QN1066 胞漿蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品簡介
胞漿蛋白提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于科研試驗,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價位合理,需要胞漿蛋白提取試劑盒等蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
產(chǎn)品詳細介紹
特別提示:包括胞漿蛋白提取試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:胞漿蛋白提取試劑盒
產(chǎn)品貨號:QN1066
產(chǎn)品規(guī)格:50T|100T
胞漿蛋白提取試劑盒用于哺乳動物組織和細胞中提取胞質(zhì)蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為溫和,可獲得蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。
操作方法:
1、組織總蛋白的提取
(1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;
(2)稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;
(3)將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4℃,12000g離心30min;
(4)吸取上清至新的管中;
(5)進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80℃,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
(1)裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
(2)貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;
(3)在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
(4)將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
(5)懸浮細胞:4℃400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數(shù)加入裂解液,
(6)渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
(7)裂解完畢之后,將細胞裂解液4℃,12000g離心30min;
(8)將上清移入新的EP管中;
(9)進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80℃,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
注意事項:
1、實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
2、PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解。
儲存條件 :-20℃
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