YT137 TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒
- 產品/服務：YT137 TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒
- 型 號：YT137
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：870
產品簡介
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒的品牌是百奧萊博，是優質的細胞凋亡與增殖產品，本制品用于科學研究，本產品質量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒等細胞凋亡與增殖產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)
英文名稱：Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
產品貨號：YT137
產品規格：20次|50次
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于待檢測的細胞或組織樣品，經過生物素標記和后續的DAB顯色等步驟，即可在普通光學顯微鏡下觀察到凋亡細胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。
試劑盒組分：
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀釋液(選用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀釋液———1ml
DAB顯色液A————————6ml
DAB顯色液B————————6ml
標記反應終止液——————6ml
細胞在發生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時，暴露的3"-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標記的dUTP(Biotin-dUTP)，隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標記的Streptavidin (Streptavidin-HRP)結合，zuì后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細胞，從而可以通過普通光學顯微鏡檢測到凋亡的細胞，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。
本試劑盒有如下優點：
(1)高靈敏度：背景染色低，陽性染色強，可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡，同時由于凋亡早期就有 DNA斷裂，可以檢測到早期的細胞凋亡。
(2)特異性好：TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞，而不容易標記壞死細胞。
(3)快速：僅需約2-3個小時即可完成。
(4)應用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。
TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區分開，另一方面也不會把射線等誘導發生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。
少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下，zuì好同時檢測多個凋亡指標。
注意事項：
1. 需自備用于洗滌細胞的PBS或HBSS，用于封片的抗熒光淬滅封片液(YT097)等適當的封片液，用于固定的4%多聚甲醛或向百奧萊博訂購免疫染色固定液(YT086)，同時需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向百奧萊博訂購免疫染色洗滌液(YT089)。 需自備過氧化氫，除石蠟切片外需自備甲醇。
2. 如果用于石蠟切片的檢測，需自備蛋白酶K，二甲苯。
儲存條件：-20℃。
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貨號：SNM531
規格：50T|20T
名稱：Caspase3/7活細胞熒光實時法檢測試劑盒
貨號：KFS208
規格：100T|50T
凋亡早期的重要特征之一是半胱氨酸特異性蛋白酶——caspase家族蛋白的活性激活。這一類酶可以參與到一系列的生化反應中，響應凋亡早期信號并導致相應的蛋白底物剪切，繼而引發細胞解體。目的底物可識別的序列包含天門冬氨酸殘基，剪切發生在序列的羰基段。
Caspase3/7活細胞熒光實時法檢測試劑盒采用的熒光底物為原料，可以檢測凋亡細胞中激活的caspase3/7.這種具有膜親和型的檢測試劑盒由一個4氨基的小肽（DEVD）和一種核酸結合染料。凋亡發生時，caspase3/7蛋白被激活，從而剪切caspase3/7識別序列DEVD肽段。剪切底物后，游離的核酸染料與DNA結合，從而發出亮綠色熒光信號。
操作步驟
1.1 以合適的培養基懸浮細胞或貼壁細胞，加入合適的化合物或藥物，刺激細胞誘導凋亡。
1.2 去除藥物或化合物，以新鮮培養基洗滌細胞2-3次，更換新鮮培養基后，以1μL/mL的量加入caspase3/7檢測液，使得caspase3/7檢測試劑工作液濃度為1μM。（注意： Caspase3/7 檢測試劑工作液濃度為0.5μM~2μM，您根據細胞量以及培養液的體積進行調整優化。）
1.3 37℃，避光孵育30min，或室溫孵育45-60min。
1.4 熒光顯微鏡觀察拍照或熒光光度計讀數。
名稱：DAPI染液(即用型)
貨號：SY0496
規格：10ml
本產品濃度已經過優化，確保可以滿足各種常規染色的需要。如需使用特定濃度的DAPI，請選購DAPI（SY0495）或DAPI染液（5mg/ml）（SY0496）。
DAPI，也稱DAPI dihydrochloride，是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，和雙鏈DNA結合后可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。因為DAPI是含有特定AT序列DNA的一種嵌入劑，它能像Hoechst染料一樣粘附在DNA雙螺旋的小溝區。盡管DAPI不能通過活細胞膜，但卻能穿透擾亂的細胞膜而對核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI-DNA復合物的激發和發射波長分別為360nm和460nm。
DAPI染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。
CAS：28718-90-3
分子式：C16H17Cl2N5
分子量：350.25
儲存條件：4℃，有效期六個月
注意事項
1)DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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