YT005 RNase A
- 產品/服務：YT005 RNase A
- 型 號：YT005
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：925
產品簡介
北京百奧萊博供應的RNase A 用于科學研究，我公司的RNase A 品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括RNase A (10mg/ml)(不含DNase)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：RNase A (10mg/ml)(不含DNase)
英文名稱：Ribo
產品貨號：YT005
產品規格：1ml
本品用于消化RNA，濃度為10mg/ml,不含DNase，可直接使用。用于各種常見的分子生物學、細胞生物學等相關實驗。
儲存條件：-20℃。
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名稱：大腸桿菌BL21 Star(DE3)化學感受態細胞
貨號：BTN150801
規格：10*100μL
BL21 Star(DE3)感受態細胞來源于BL21(DE3)菌株，由特殊工藝制作，使用pUC19質粒檢測本產品，轉化效率可達10cfu/μg。
BL21 Star(DE3)菌株的特點是含有rne131基因突變體。rne131突變基因能夠增強菌株細胞內mRNA的穩定性，從而有效提高蛋白表達能力。本產品主要適用于T7啟動子表達載體(如pET 系列)的高水平蛋白表達。
菌株基因型為：F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm rne131(DE3)。
儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。
自備試劑：目的DNA、LB培養基等。
使用方法：
1.從-80℃冰箱中取出感受態細胞，置于冰上解凍。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μL，可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以100μL感受態細胞為例。
2. 取 100μL冰上融化的BL21 Star(DE3)感受態細胞，加入目的質粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
3. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
4. 向離心管中加入700μL不含抗生素的無菌培養基(LB)，混勻后37℃，200rpm 復蘇60分鐘。
5. 取100μL左右菌液涂布于含相應抗生素的LB培養基上。如果轉化高濃度的質粒，可以減少涂布的量。
6. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
名稱：大腸桿菌BL21(DE3)pLysS化學感受態細胞
貨號：BTN90507
規格：0.1mL*10
本產品是大腸桿菌BL21(DE3)plysS菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。使用pUC19質粒檢測本產品，轉化效率可達107。該菌株帶有質粒plysS，具有氯霉素抗性，此質粒含有表達T7 溶菌酶的基因，T7 溶菌酶能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾IPTG 誘導的表達。本感受態細胞具有氯霉素抗性，適合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表達。
菌株基因型為：F- ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)pLysS Camr
儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。
自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養基等。
使用方法：
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μL，根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB 固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
注意事項：
1. 涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA 總量較少，可取200-300μL轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少，可通過離心(4,000rpm，2分鐘)后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。
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