ALH608 細胞凋亡檢測試劑盒
- 產品/服務：ALH608 細胞凋亡檢測試劑盒
- 型 號：ALH608
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：896
產品簡介
細胞凋亡檢測試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研試驗，本品質量穩定，價位合理，需要細胞凋亡檢測試劑盒等DNA提取純化產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示：包括細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI雙染)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI雙染)
英文名稱：Apoptosis detection kit (Annexin V-FITC probe)
產品貨號：ALH608
產品規格：25次|50次
本試劑盒以標記了FITC的Annexin Ⅴ作為熒光探針，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發生。細胞凋亡是細胞的基本特征之一，它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定等方面起著十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine，PS）高親和力特異性結合。
Propidium iodide（PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。將Annexin Ⅴ與PI匹配使用，可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區分開來。
試劑盒組份：
Annexin V-FITC(20ug/ml)————————500ul
Binding Buffer—————————————20ml
Propidium Iodide(PI)(50ug/ml)—————125ul
注意事項
1. 為保證得到理想的實驗結果，在使用此試劑盒之前請認真閱讀該注意事項；
2. 試劑（尤其是小瓶裝的試劑）在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落；
3. Propidium iodide（PI）能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用；
4. 此試劑盒僅供科研使用，不宜用于臨床診斷；
5. 本試劑盒中提供的PBS 為隨試劑贈送，并非試劑盒的真正組成成分；細胞的洗滌同常規方法。
儲存條件：2～8℃，有效期12個月。
本制品別名：凋亡細胞檢測試劑盒
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名稱：柱式動物線粒體DNA提取試劑盒(PCR級)
貨號：BTN80803
規格：50次
線粒體DNA(mtDNA)是進行分子進化研究和母性遺傳研究的重要材料，但傳統的兩步式mtDNA提取方法是先溫和裂解細胞，分離線粒體，然后再從線粒體中提取mtDNA。此方法中的溫和裂解細胞的條件十分難以控制，需要針對不同組織材料單獨進行優化。本試劑盒克服了上述缺點。
產品特點：
1. 不需要單獨純化線粒體，柱式法純化，操作簡單快捷。
2. 得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。
3. 每107個動物細胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克組織一般能得到3-5μg mtDNA。
4. 注意：本產品只適合于動物材料，不適合于植物材料，因為植物線粒體DNA一般都十分巨大，非常難提。
產品組成：
| 成分 | 規格 |
| 溶液A | 13ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 18ml |
| 離心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脫液 | 10ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸，短期可以在室溫放置；長期保存zuì好放4℃。
使用方法：
一：培養細胞預處理
1. 用自備的0.25%胰酶消化液處理約107個培養細胞，離心收集后棄上清。
2. 用PBS或TBS等緩沖液洗滌細胞兩次，離心得到的細胞沉淀直接用于mtDNA提取。
二：組織細胞預處理
3. 用剪刀將1g新鮮的動物組織剪碎(芝麻大小zuì好)，轉移到1.5mL塑料離心管中，用于mtDNA提取。注意：zuì好不要使用凍存的動物組織，因為凍凝過程中形成的冰晶會將線粒體刺破，使其DNA釋放出來被胞漿中的DNA酶降解，影響回收率。
三：血液預處理
4. 將3-5mL抗凝外周血靜置30分鐘或低速離心5分鐘，取白細胞層。
5. 用自備PBS洗滌白細胞兩次，得到的白細胞沉淀用于mtDNA提取。
四：mtDNA提取
5.在細胞沉淀或剪碎的組織中加入250μL冰浴的溶液A，充分吹打分散。如果是剪碎的組織，不要等成塊的組織溶解即可繼續下步操作。
6. 加入250μL常溫的溶液B(如果溶液B有沉淀，用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用)，溫和反復顛倒混勻10次。千萬不要劇烈振蕩。
7. 冰上放置6-8分鐘。注意不要超過8分鐘。
8. 加入350μL冰浴的溶液C，溫和混勻4-6次，可見白色沉淀物產生，然后放冰上放置20-25分鐘。
9.室溫12000～15000g離心10分鐘，小心將上清液轉移到離心吸附柱中。由于此時的溶液比重較大，有時候出現沉淀漂浮是正常現象，取上清時避開漂浮的沉淀即可。
10. 靜置5分鐘以讓DNA與離心吸附柱充分結合，此步十分重要。
11.室溫12000～15000g離心1分鐘，棄收集管中的廢液。
12. 加入500μL的通用洗柱液，室溫12000～15000g離心1分鐘，棄收集管中廢液。
注意：通用洗柱液中含乙醇，用后需要將蓋擰緊存放，否則乙醇會揮發。
13. 重復上步1次。
14.室溫12000～15000g離心1分鐘，甩干殘留液體。此步不能省略，否則殘留乙醇會影響DNA的后續使用(如DNA上樣時不能沉淀到加樣孔中)。
15. 將離心吸附柱置于一個新的1.5mL塑料離心管中，加入30-50μL 65-80℃預熱的DNA洗脫液，室溫放置2分鐘。常溫的DNA洗脫液也可以用于洗脫，但產量稍微有所降低。
16.室溫12000～15000g離心1分鐘，離心管底溶液即mtDNA。
17. 由于本公司離心吸附柱結合DNA能力較強，如果再加30-50μL DNA洗脫液到離心吸附柱中，往往還能洗脫下很多mtDNA(相當于次洗脫的20-30%)，但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液來洗脫。
18. 12000～15000g離心1分鐘，離心管底溶液即線粒體DNA。每107個動物細胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克組織一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要濃縮，可以使用本公司的核酸濃縮劑。
19. 由于DNA機械斷裂，電泳時DNA可能不呈現專一的帶，但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。
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