WE0170 DNA產(chǎn)物快速純化試劑盒

產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應的DNA產(chǎn)物快速純化試劑盒用于科研目的,DNA產(chǎn)物快速純化試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)DNA提取純化之一,質(zhì)量堪比同類進口產(chǎn)品,價格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細介紹
特別提示:包括DNA產(chǎn)物快速純化試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:DNA產(chǎn)物快速純化試劑盒
英文名稱:DNA Product Quick Clean-up Kit
產(chǎn)品貨號:WE0170
產(chǎn)品規(guī)格:50次|200次
本試劑盒采用硅基質(zhì)膜技術和試劑配方,通過離心吸附柱快速簡單的結合-洗滌-洗脫三步即可從PCR產(chǎn)物或酶反應液(酶切,連接,探針標記等)中純化回收100 bp-10 kb的DNA片段,每個吸附柱zuì高可吸附10μg的DNA,同時zuì大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等雜質(zhì)。純化回收的DNA純度及濃度高,完整性好,回收率高,可直接用于測序、連接和轉(zhuǎn)化、標記、體外轉(zhuǎn)錄等分子生物學實驗。
試劑盒組成:
| 組份 | 50次 | 200次 |
| Buffer PB | 30ml | 120ml |
| Buffer PS | 15ml | 60ml |
| Buffer PW(濃縮) | 6ml | 25ml |
| Buffer EB | 10ml | 30ml |
| 離心吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
產(chǎn)品特點
1、快速簡單:操作步驟少,15分鐘完成,同時可處理多個樣品,節(jié)省時間。
2、回收率高:硅基質(zhì)膜技術和試劑配方保證每次zuì大量回收到純度高的目的DNA。
3、處理量大:每個離心吸附柱每次zuì多可吸附的DNA 量為10μg。
自備試劑:無水乙醇。
實驗前準備及重要注意事項:
1、所有組分可在干燥、室溫(15~30℃)環(huán)境穩(wěn)定保存1年,更長時間保存可置于2- 8℃。當溶液低溫保存時,使用前需在室溫中放置一段時間,恢復至室溫后使用。
2、本試劑盒可無選擇性回收溶液中所有DNA片段,如需選擇性回收特定片段,同時去除其他不同大小片段,請選擇我公司的膠回收試劑盒(WE0168)
3、次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。
4、使用前請檢查Buffer PB是否出現(xiàn)結晶或者沉淀,如有結晶或者沉淀現(xiàn)象,可在37℃水浴幾分鐘,即可恢復澄清。
5、回收效率與初始DNA量和洗脫體積有關,初始量越少,洗脫體積越少,回收率越低。
6、所有離心步驟均可室溫下進行。
操作步驟:
1、估計DNA反應液的體積,加入5倍體積的 Buffer PB,充分混勻(無需去除石蠟油或礦物油)。
注意:
1)如DNA反應體系為50μl(不包括石蠟油體積),則加入250μl Buffer PB。
2)在加入Buffer PB后檢測溶液的pH值,若pH值>7.5,可向其中加入10-30μl的3 M醋酸鈉(pH5.0),從而將pH值調(diào)到5-7。
2、柱平衡:向已裝入收集管中的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS,13000rpm(~~~16200×g)離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
3、將步驟1中所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中,室溫放置1分鐘,13000rpm離心30-60 s,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
注意:吸附柱容積為750μl,若樣品體積大于750μl可分批加入 。
4、向吸附柱中加入500μl Buffer PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)13000rpm離心30-60 s,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
注意:如果純化的DNA用于鹽敏感實驗(例如平末端連接實驗或直接測序),建議加入Buffer PW后靜置2-5分鐘再離心。
5、13000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數(shù)分鐘,以徹底晾干。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除,乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶促反應(酶切、PCR等)。為確保下游實驗不受殘留乙醇的影響,建議將吸附柱開蓋,置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的乙醇。
6、將吸附柱放到一個新離心管(自備)中,向吸附膜中間位置懸空滴加30-50μl Buffer EB,室溫放置1分鐘。13000rpm離心1分鐘,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液,應保證其pH值在7.0-8.5之間(可以用NaOH將水的pH值調(diào)到此范圍)。
2)為了提高DNA的回收量,可將離心得到的溶液重新加到吸附柱中,室溫放置2分鐘,13000rpm離心1分鐘。
3)洗脫體積不應小于30μl,體積過少會影響回收效率。
4)回收>10 kb的DNA片段時,Buffer EB應在50℃水浴中預熱,適當延長吸附和洗脫時間,可增加回收效率。
儲存條件:室溫(15~30℃)。
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