WE0187 土壤基因組提取試劑盒
- 產品/服務：WE0187 土壤基因組提取試劑盒
- 型 號：WE0187
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-23
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1183
產品簡介
土壤基因組提取試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學研究方面，我公司專注于DNA提取純化產品的研發、生產和供應，為您提供的土壤基因組提取試劑盒質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示：包括土壤基因組提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：土壤基因組提取試劑盒
英文名稱：Soil Genomic DNA Extraction Kit
產品貨號：WE0187
產品規格：50次
本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的干燥土壤、濕泥、淤泥及海河沉淀物中提取總DNA。本產品使用安全方便，單個樣品操作一般可在40分鐘內完成。使用本品每克土壤可獲得5μg以上的DNA，片段長度主要在20-30 kb之間。本試劑盒采用獨特的溶液能夠有效去除雜質和腐殖酸，通過優化的緩沖系統使裂解液中的DNA結合到吸附柱上，土壤中殘留的雜質、PCR和酶反應的抑制劑可通過兩步洗滌步驟有效去除，zuì后使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可獲得高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。
試劑盒組成：
| 組份 | 50次 |
| Buffer SW | 60ml |
| Buffer SL | 30ml |
| Buffer GLS | 30ml |
| Buffer PR(濃縮液) | 13ml |
| Buffer GW1(濃縮液) | 13ml |
| Buffer GW2(濃縮液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自備試劑：無水乙醇，70%乙醇。
實驗前準備及重要注意事項：
1、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
2、次使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在Buffer PR、GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。
3、使用前請檢查Buffer SL和Buffer GLS是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀，請將Buffer SL和Buffer GLS于56℃水浴重新溶解。
操作步驟：
1、取0.1 g-0.3 g土壤樣本，置于離心管(自備)中，加入1ml Buffer SW，渦旋振蕩1-3分鐘(須將管底的土壤震起來)。12000rpm(～13400×g)離心1分鐘，倒掉上清。
2、加入750μl的70%乙醇，渦旋振蕩1分鐘(須將管底的土壤震起來)，12000rpm離心1分鐘，倒掉上清，用移液器將余液吸盡。
3、向沉淀中加入500μl Buffer SL，渦旋振蕩1-3分鐘(須將管底的土壤震起來)，65℃水浴20分鐘(可每隔5分鐘渦旋振蕩5秒)，12000rpm離心3分鐘，將上清移至新的離心管(自備)中。
4、向上清液中加等體積Buffer GLS，顛倒混勻15-25次，冰上放置5分鐘。12000rpm離心5分鐘。
注意：冰上放置后液體可能會凝結，屬正常現象。
5、將步驟4中所得上清加入到已裝入收集管的吸附柱DM中，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
注意：若一次不能加完溶液，可分多次轉入。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer PR(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需進一步提高DNA純度，可重復步驟8。
9、12000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘，以徹底晾干。
注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除，乙醇的殘留會影響后續的酶促反應(酶切、PCR 等)。
10、將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中，向吸附柱的中間部位懸空加入50-100μlBuffer GE或滅菌水，室溫放置 2-5分鐘， 12000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游實驗對pH值或EDTA敏感，可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調到此范圍)，pH值低于7.0時洗脫效率不高。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或滅菌水再次洗脫可以增加產量。
4)如果要提高DNA的終濃度，可以將步驟10所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上，重復步驟10；若洗脫體積小于100μl，可以增加DNA的終濃度，但可能會減少總產量。如果DNA的量小于1μg，推薦用50μl Buffer GE或滅菌水洗脫。
5)因為保存在水中的DNA會受到酸性水解作用的影響，如需長期保存，推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。
6)基因組DNA模板中微量的殘余腐殖酸可能對PCR反應產生不良影響。此時將DNA稀釋5-100倍問題通常即可解決。如經稀釋后的DNA仍不能有效應用于PCR反應， 請使用腐殖酸清除劑，以獲得更的清除效果。
儲存條件：室溫(15～30℃)。
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名稱：一管式拭子DNA提取試劑盒
貨號：BTN60501
規格：100次
本試劑盒專門用于從口腔拭子中快速提取能夠用于PCR的基因組DNA。也可以用于提取微量血液，精液，血斑/精斑等法醫物證的DNA。
產品特點：
1.快速，整個操作過程只需要十分鐘，在一個離心管中完成。
2. DNA樣品可直接用于PCR反應。
3.樣品可以在4℃長期保存。
4. 不需要使用任何有毒的試劑。
5. 高。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| 無菌拭子 | 100只 |
| 1.5mL離心管 | 100只 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 10ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸及保存。有效期一年。
使用方法：
1. 將醫用棉球拭子涂抹面頰的口腔內表面約十次，放入加有0.5mL溶液A的1.5mL塑料離心管中。
2. 剪去口腔拭子柄部，留藥棉頭于離心管中，蓋上離心蓋后振蕩一分鐘。
3. 95℃保溫5分鐘，用鑷子取出離心管中藥棉頭，并在離心管壁盡量擠出其中的液體。
4. 加入50μl的溶液B，振蕩半分鐘。
5.室溫12000 g離心2分鐘。
6. 直接取上清作為模板加入到PCR反應體系中進行擴增，所加量以PCR的總體積的1/５為宜(即50μl的PCR 體系加10μl處理液)。
7. 剩余樣品放4℃保存。
使用效果：
圖注:用本產品提取涂抹面頰后的拭子的口腔上皮細胞DNA，zuì后分別取5μl(5號樣)和10μl(10 號樣)作為模板進行PCR,反應完后取10μl上樣電泳。擴增片段為人-actin基因，長度為610bp，M表示100bp DNA Ladder，zuì大片段為600bp。電泳在SuperBuffer-2中進行，300 V，5分鐘。
疑難解答：
Q：能否濃縮第六步上清中的DNA？
A：可以用鹽/乙醇法濃縮DNA，用濃縮后的DNA做模板擴增效果更好。
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