KFS212 細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒

產品簡介
細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒是高品質的細胞凋亡與增殖產品,由北京百奧萊博供應,本產品僅用于生物化學研究方面,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒等細胞凋亡與增殖產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)
英文名稱:JC-1 Apoptosis Detection Kit
產品貨號:KFS212
產品規格:10T|20T|50T|100T
本試劑盒可應用于細胞、組織或純化的線粒體膜電位檢測。大量的研究表明線粒體與細胞凋亡密切相關,其中線粒體跨膜電位(△?)的破壞,被認為是細胞凋亡級聯反應過程中zuì早發生的事件之一,它發生在細胞核凋亡特征(染色質濃縮、DNA斷裂)出現之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰,則細胞凋亡不可逆轉。
本試劑盒采用JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)一種陽離子脂質熒光染料作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態,在低濃度時以單體的形式存在,高濃度時以多聚體形式存在,兩者的發射光譜不同,但均可在流式細胞儀綠色(FL-1)通道檢測出綠色熒光,JC-1可透過正常細胞膜以單體狀態聚集胞內,正常健康線粒體的膜電位(△?)具有性,JC-1依賴于△?的性被迅速攝入線粒體內,并因濃度增高而在線粒體內形成多聚體,多聚體發射光為紅色熒光;可被流式細胞儀的紅色(FL-2)通道檢測到,而細胞發生凋亡時,線粒體跨膜電位被去化,JC-1從線粒體內釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質內發綠色熒光。根椐這一特征檢測線粒體膜電位的變化。
注意事項
1. 微量試劑取用前請離心集液。
2. JC-1 避光保存及使用。
3. 細胞培養至匯合度80-90%,收集細胞量在1×106/Test。
4. 對PH 變化過于敏感的細胞建議用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗滌,或延長觀測時間。
5. 流式細胞儀檢測線粒體膜電位變化受到多種因素的影響,因誘導劑、細胞株類型,作用時間的不同而熒光強度比例都有不同,因此沒有通用標準的補償設門指南,因此每個試驗需設陰性及陽性對照組進行熒光補償及設門。
6. 組織需先制備單細胞懸液或提取純化線粒體后方可進行檢測,可選用我司細胞懸液制備試劑盒或線粒體提取試劑盒。
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名稱:CFDA SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒
貨號:YT157
規格:2000次
本試劑盒是基于一種熒光探針CFDA SE的用于細胞增殖檢測和細胞熒光示蹤的檢測試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細胞增殖檢測方法。基于CFDA SE熒光標記的細胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入、BrdU標記獲得的檢測結果完全一致,但同時可以提供更多的細胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細胞群中有多少比例的細胞分裂了1次、2次或更多次數,同時如果和其它熒光探針聯用,可以獲取不同分裂次數細胞的其它相關信息。
CFDA-SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式為C29H19NO11,分子量為557.47,CAS number為150347-59-4。CFDA SE可以通透細胞膜,進入細胞后可以被細胞內的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶發性地(spontaneously)并不可逆地和細胞內蛋白的Lysine殘基或其它氨基發生結合反應,并標記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時,即可充分標記細胞。被CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩定,穩定標記的時間可達數個月。CFDA SE標記細胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均勻。
由于CFDA SE標記細胞的熒光非常均勻和穩定,每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半,這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞,分裂一次的細胞(1/2的熒光強度),分離兩次的細胞(1/4的熒光強度),分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數的細胞。采用CFDA SE通過流式細胞儀檢測獲得的檢測結果參考右圖。每一個峰代表一種分裂次數的細胞,從右至左的峰通常依次為分裂0次、1次、2次、3次等次數的細胞。分裂次數較多后,分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數較少的細胞會逐漸減少直至檢測不到。
使用CFDA SE可以檢測分裂多達8次或更多次數的細胞增殖。目前CFDA SE標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。zuì常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可以用于成纖維細胞、NK細胞等其它細胞的增殖檢測,甚至還可以用于細菌增殖的檢測。
CFDA SE標記細胞呈綠色熒光,檢測時的激發波長可以選擇488nm,此時的發射波長為518nm,使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。CFDA SE標記的細胞也可以用熒光顯微鏡進行觀察。CFDA SE標記的細胞無論在體外還是體內都不會使鄰近細胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標記后不會從一個細胞轉移到鄰近細胞。CFDA SE標記細胞僅需5-15分鐘即可完成。對于不同細胞,zuì佳標記時間需自行摸索。
本試劑盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE進行細胞標記時所需的配套試劑。如果每個檢測樣品的熒光探針標記體積為1ml,本試劑盒共可以檢測2000個樣品。

試劑盒組份:
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶劑————————————1ml/管,共兩管
CFDA SE細胞標記液(10X) ——————100ml/瓶,共兩瓶
注意事項:
1. CFDA SE配制成儲存液后宜在一個月內使用完畢,zuì長不宜超過2個月。CFDA SE易被水解,在水溶液中會很快變質。請在使用過程中避免接觸水。在標記細胞的過程中和水接觸是在許可的范圍內的。
2. CFDA SE溶劑在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
儲存條件:-20℃,有效期6個月。

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