MT0030 LAMP試劑盒(含染料)
- 產品/服務：MT0030 LAMP試劑盒(含染料)
- 型 號：MT0030
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-29
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1017
產品簡介
LAMP試劑盒(含染料)是高品質的核酸擴增(PCR)產品，由北京百奧萊博供應，本產品僅用于生物化學研究方面，本品質量穩定，價位合理，需要LAMP試劑盒(含染料)等核酸擴增(PCR)產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示：包括LAMP試劑盒(含染料)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：LAMP試劑盒(含染料)
英文名稱：Loop-mediated isothermal amplification Kit(With visible light dye)
產品貨號：MT0030
產品規格：50T|200T
LAMP(環介導等溫擴增技術)是一種核酸擴增技術，采用4或6條能夠識別目的基因上的6個特異區域的引物，依賴于Bst DNA聚合酶的強鏈置換活性，在30～60分鐘內DNA擴增可達109～1010倍。本試劑盒含有可見光染料，陽性擴增樣品的顏色為天藍色，陰性擴增為紫羅蘭色。購買本試劑盒，我們可以為客戶設計引物，需要設計引物的請發Email咨詢。
產品特點：
1．檢測方便：變色反應，顏色變化明顯，肉眼即可觀察。
2．操作簡單：一步反應30分鐘即可完成。
3．特異性高：六條特異性引物，保證了產物的特異性和檢測的可靠性。
4．儀器簡單：只需維持恒溫的水浴鍋。
5．靈敏度高：能從低拷貝中擴增靶基因。
6．應用廣泛：廣泛適用于微生物致病菌檢測和疫病檢測。
產品組成：
| 組分 | 50T |
200T |
| 10×可見光染料 | 150μl | 1ml |
| 10×LAMP Buffer | 1ml | 1ml |
| 100 mM MgSO4 | 500μl | 500μl |
| 10 mM dNTP Mixture | 500μl | 1ml |
| Bst DNA Polymerase 2.0 | 50μl | 200μl |
注意：10×LAMP Buffer中的Mg2+濃度為60 mM。
保存條件：-20℃，避免反復凍融，有效期3年。
反應實例：
應用本試劑盒和6條引物擴增HHV-6 DNA，產物分別可見光染料顯色觀察和電泳法檢測
使用方法：
1．按以下組分配置反應混合液：
| 加入物 | 加入量 |
| 10×LAMP Buffer | 2.5μl |
| 10×可見光染料 | 2.5μl |
| 10mM dNTP Mixture | 2μl |
| 模板 DNA | Xμl |
| *10×LAMP Primer Mix | 2.5μl |
| Bst DNA Polymerase 2.0 | 1μl |
| ddH2O | Up to 25μl |
*10×LAMP Primer Mix：FIP/BIP 16μM each，Loop F/R 8μM each，F3/B3 2μM each
2．反應體系配好后，充分混勻并短暫離心，65℃ 30分鐘。
注意事項：
1．為了減少交叉污染，請分區操作（試劑和模板DNA的配置操作zuì好在不同區域中進行）。
2．實驗時，所需模板量取決與樣品類型（0.1ng～100ng），可行預實驗確定模板量。
3．10×LAMP Buffer中含有60 mM MgSO4，反應體系中Mg2+終濃度為6 mM。通常無需添加即可，必要情況下可提高到10～16mM。
4．各區物品均為專用，不可交叉使用，防止污染。
5．實驗過程中應穿工作服，帶手套，建議使用帶濾芯的一次性吸頭。
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名稱：cDNA鏈合成試劑盒(逆轉錄試劑盒)(RT試劑盒)
貨號：BTN60906
規格：50次
本試劑盒提供合成cDNA鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)合成mRNA的全長cDNA拷貝。
產品特點：
1. 使用突變的反轉錄酶，內源RNase H活性低。
2. zuì長可合成13Kb的cDNA。
3.可以使用oligo-dT、隨機引物和RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提供)。
4. 總RNA、poly(A)+RNA或特殊RNA 均可作為模板。
5.可用于cDNA文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| MMLV(含RI) | 100μl |
| RT Buffer(含dNTP) | 300μl |
| Oligo(dT)18引物(0.5μg/μL) | 50μl |
| Random Primer(0.2μg/μL) | 50μl |
| RNase-free水 | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一：合成PCR用的1st-strand cDNA
1. 按下表配制RT反應體系：
| RNA 模板 | |
| 總RNA | 100-500ng |
| 或poly(A)mRNA | 10-500ng |
| 或專一的RNA | 0.01pg-500ng |
| 注意：RNA樣品不能含有基因組DNA污染。 | |
引物
| Oligo(dT)18(0.5μg/μL) | 1μl |
| 或隨機引物(0.2μg/μL) | 1μl |
| 或RNA 模板專一性引物 | 15-20 pmol |
| 注意：隨機引物與RNA 模板的比例跟cDNA 合成的平均長度成反比。 | |
| RNase-free水 | 補水到13μL |
2. 70℃保溫5分鐘后立即冰浴。
3. 再加入5μl RT Buffer(含dNTP)。
4. 37℃保溫5分鐘。對富含二級結構的高GC RNA 模板，可以改成45℃保溫5分鐘。如果使用隨機引物，則改成25℃ 5分鐘。
5. 加入2μL MMLV逆轉錄酶(含RI)，反應終體積為20μL。
6. 42℃保溫60分鐘(但如果使用隨機引物，需要先25℃保溫10分鐘，然后再轉移到42℃保溫60分鐘)。此步為RT反應。
7. 70℃保溫10分鐘以終止反應，然后放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作為PCR 模板使用，不需要純化。
二：合成建文庫用的1st-strand cDNA
1. 按下表配制RT反應體系:
| RNA模板 | |
| poly(A)mRNA | 1μg |
| 或專一的RNA | 0.5-1μg |
| 注意：RNA樣品不能含有基因組DNA污染。 | |
| 引物 | |
| Oligo(dT)18(0.5μg/μL) | 1μl |
| 或隨機引物(0.2μg/μL) | 1μl |
| 或RNA模板專一性引物 | 100 pmol |
| 注意：隨機引物于RNA模板的比例跟cDNA合成的平均長度成反比。 | |
| RNase-free水 | 補水到13μL |
2. 70℃保溫5分鐘后立即冰浴。
3. 再加入5μl RT Buffer(含dNTP)。
4. 37℃保溫5分鐘。對富含二級結構的高GC RNA模板，可以改成45℃保溫5分鐘。如果使用隨機引物，則改成25℃ 5分鐘)。
5. 加入2μl MMLV逆轉錄酶(含RI)，反應終體積為20μL。
6. 42℃保溫60分鐘(但如果使用隨機引物，需要先25℃保溫10分鐘，然后再轉移到42℃保溫60分鐘)。此步為RT反應。
7. 70℃保溫10分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的cDNA可以用于第二鏈cDNA的合成或放置在-20℃長期保存。
三：用對照模板合成cDNA(需要用同位素，需要對照的客戶需要單獨跟我司聯系)
1. 按下表配制RT反應體系:
| 對照RNA模板(0.5μg/μL) |
2μl 引物 | |
| Oligo(dT)18(0.5μg/μL) | 1μl | |
| 或隨機引物(0.2μg/μL) | 1μl | |
| 或對照專用引物 | 2μl | |
| RNase-free水 | 補水到13μl |
2. 70℃保溫5分鐘后立即冰浴。
3. 再加入5μL RT Buffer(含標記dNTP，本試劑不提供)。
4. 37℃保溫5分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是25℃。
5. 加入2μL MMLV 逆轉錄酶(含RI)，反應終體積為20μL。
6. 42℃保溫60分鐘(但如果使用隨機引物，需要先25℃保溫10分鐘，然后再轉移到42℃保溫60分鐘)。
7. 加1μL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8.電泳檢測。合成的cDNA的量一般有加入RNA總量的50%以上，電泳一般能出現1.1Kb的片段(如果使用隨機引物，將出現多個小片段)。
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