WH0215 拭子基因組DNA提取試劑盒(

產品簡介
拭子基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)是高品質的DNA提取純化產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于生化實驗研究等領域,我公司的拭子基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括拭子基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:拭子基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)
英文名稱:Efficient Extraction kit for genomic DNA from swab
產品貨號:WH0215
產品規格:50次|200次
本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附膜和獨特的緩沖液系統,離心吸附板中采用的硅基質材料為材料,能夠從口腔拭子、咽拭子以及漱口水等多種口腔樣本中、專一吸附DNA,可zuì大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質量穩定可靠。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作,包括酶切、PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。
試劑盒組成:
| 組分 | 50次 | 200次 |
| 組織消化液GHA | 30ml | 120ml |
| 緩沖液GBS | 15ml | 60ml |
| 去蛋白液RD | 24ml | 90ml |
| 漂洗液PWE | 25ml | 50ml |
| 洗脫緩沖液TB | 15ml | 30ml |
| Proteinase K | 500μl | 2×1ml |
| 吸附柱CB2 | 50個 | 200個 |
| 收集管(2ml) | 50個 | 200個 |
| 離心管(1.5ml) | 50個 | 200個 |
保存條件:室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個月,更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產生沉淀,使用前應將試劑盒內的溶液在室溫放置一段時間,必要時可在37℃水浴中預熱10min,以溶解沉淀。
選配試劑:口拭子樣本保存液(目錄號:WH0214)
注意事項:請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
1.樣品應避免反復凍融,否則會導致提取的核酸片段較小且提取量降低。
2.若緩沖液GBS中有沉淀,可在室溫中重新溶解,搖勻后使用。
3.如果樣本不能及時提取,可保存在口拭子保存液中(目錄號:WH0214),長期保存不會影響提取效果。
操作步驟
使用前請先在緩沖液GBS中加入異丙醇;在去蛋白液RD和漂洗液PWE中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽。
1.處理材料:
1)口腔拭子樣本提取
將在面頰內擦拭過的拭子轉移到2ml離心管中,加入500μl緩沖液GHA。加入10 μl Proteinase K溶液,渦旋10 sec混勻,65℃放置15-30 min,每隔10min渦旋混勻數次,取出300-350 μl進行后續實驗。
2)咽拭子樣本提取
將在咽部擦拭過的拭子轉移到5 ml離心管中,加入1 ml-2ml的組織消化液GHA,顛倒混勻。在提取前取出300-350 μl的樣品,加入10 μl Proteinase K溶液,渦旋10 sec混勻,65℃放置30 min,每隔10min渦旋混勻數次。
3)唾液樣本提取
按照要求取出唾液樣本,加入等體積的緩沖液GHA,顛倒混勻。在提取前取出300-350 μl的樣品,加入10 μl Proteinase K溶液,渦旋10 sec混勻,65℃放置30 min,每隔10min渦旋混勻數次。
注意:如果樣本已經保存在其他廠家的樣品保存液里,加入樣品1/2體積的組織消化液GHA和10 μl Proteinase K溶液,渦旋10 sec混勻,65℃放置15-30 min,取出300-350 μl進行后續實驗。提取咽拭子樣本和唾液樣本時,若組織消化液GHA不足,需另行購買。
2.加入500μl緩沖液GBS(使用前請先檢查是否已加入異丙醇),充分顛倒混勻,室溫放置5 min。
3.將上一步所得溶液都加入一個吸附柱CB2中(吸附柱CB2放入收集管中),12000rpm(~13400×g)離心30 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CB2放回收集管中。
4.向吸附柱CB2中加入500μl去蛋白液RD(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm (~13400×g)離心30 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CB2放回收集管中。
5.重復操作步驟4一次。
6.向吸附柱CB2中加入600 μl漂洗液PWE(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm (~13400×g)離心30 sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱CB2放回收集管。
7.重復操作步驟6一次。
8.12000rpm (~13400×g)離心2 min,倒掉廢液。將吸附柱CB2室溫放置數分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
9.將吸附柱CB2轉入一個干凈的離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加50 μl洗脫緩沖液TB,室溫放置2-5 min,12000rpm (~13400×g)離心2 min。
10.將溶液收集到離心管中,并于適當條件保存。
DNA濃度及純度檢測:
·得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。
· DNA應在OD260處有顯著吸收峰,OD260值為1相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。
· OD260/OD280比值應為1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用ddH2O,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。
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