北京百奧萊博供應的植物蛋白提取試劑盒(無去垢劑)用于科研目的，植物蛋白提取試劑盒(無去垢劑)是我司眾多優質蛋白質研究之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括植物蛋白提取試劑盒(無去垢劑)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：植物蛋白提取試劑盒(無去垢劑)
英文名稱：Plant protein extraction kit (no descaling agent)
產品貨號：HR8038
產品規格：50T|100T

植物蛋白提取試劑盒(無去垢劑組份)提供全套試劑，適用于從各種植物細胞、組織樣本中提取總蛋白。提取過程簡單方便。
本試劑盒的所有組份均不含去垢劑成分，zuì后得到的蛋白樣品的成分對NI 柱純化、分子篩、離子交換、親和純化等下游應用沒有明顯影響。
本試劑盒含有的獨特配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。
本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。
本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。
本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。
本試劑盒提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成分，不可直接用于2D電泳，如下游實驗需要直接用于等電聚焦、雙向電泳，請使用我公司其他貨號的試劑盒。也可以將zuì后樣品除鹽后再用于2D電泳，用脫鹽柱脫鹽處理(相關產品HR0389)。
我公司可以提供針對動物細胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、液體、土壤等不同樣本的蛋白提取試劑盒，包含用于非雙向電泳和雙向電泳等不同下游應用的試劑盒以及含去垢劑成分和不含去污劑成分的蛋白提取試劑盒，專用于蛋白質譜檢測的試劑盒等總計300多種蛋白提取試劑盒可供選擇。我公司還可以提供針對動物、植物等不同樣本的細胞核、線粒體、溶酶體、葉綠體等不同細胞器的提取試劑盒。

儲存條件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白穩定劑2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。
【注】：
●蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
●蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前請仔細閱讀產品說明書 ※ ※ ※
使用限制：本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
產品更新：我公司會更新或升級產品，以優化和增強其使用性能，產品說明書會進行相應的版本更新。使用產品時，請參照隨產品附帶的說明書，不要參照網上下載的說明書，可能是不同的版本。需要zuì新電子版說明書時可以在收到產品后發郵件索取。
使用安全：使用時需要合適的實驗室外套，一次性手套。避免皮膚或粘膜與試劑接觸。如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應立即用水沖洗。

注意事項：
1．正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得zuì佳實驗效果。
2．螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3．禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4．樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5．zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
6．實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

產品特點：
1．使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。
2．提取過程簡單方便，將蛋白提取的時間縮短至1小時。
3．含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。
4．紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
5．總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。
6．蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：
儀器：
●離心機● 振蕩器● 渦旋混勻器● 移液器●冰箱●冰盒
試劑：
● PBS(pH7.4，實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液(1×))phosphate buffer saline/Dμlbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材：
●離心管● 吸頭

使用方法：

使用注意事項：
● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
● 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
●蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
● 下游用于雙向電泳、蛋白質譜等應用前需要進行脫鹽處理，可以用脫鹽柱脫鹽或透析脫鹽。
植物組織樣本：
1．提取液準備：
每500μl冷的提取液A中加入4μl蛋白穩定劑和2μl蛋白酶抑制劑，混勻后置冰上備用。
【注】：
● 根據需要處理的樣品數量準備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。
2．取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的100-200mg 鮮嫩植物組織樣本用手術剪刀盡可能剪碎，加入500μl提取液A 后用勻漿機/勻漿器充分勻漿。
【注】：
● 也可置于研缽中用液氮研磨，研磨后加入500μl冷的提取液A。
● 沒有液氮研磨條件，也可加入500μl提取液A 直接置冰上研磨。
3．將勻漿液吸入一個預冷的干凈離心管中在4℃振蕩30分鐘-1小時。
【注】：
● 使用振蕩器/搖床的較低轉速，提取液能輕微晃動即可。
● 沒有振蕩條件也可不振蕩，置4℃靜置1小時，中間每隔10分鐘充分混勻一次。
4.在4℃，12000g條件下離心10-15分鐘。
5．將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到植物總蛋白。
6．上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
【注】：
● 建議用BCA 法進行蛋白定量。相關產品：HR0329。
●蛋白樣品－80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細菌污染。
細胞樣本：
1．提取液準備：
每500μl冷的提取液A中加入4μl蛋白穩定劑和2μl蛋白酶抑制劑，混勻后置冰上備用。
【注】：
● 根據需要處理的樣品數量準備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。
2.細胞用PBS 洗滌2次。
3．加入細胞體積5-10倍體積的蛋白提取液，振蕩1小時。
4.在4℃，12000g條件下離心10-15分鐘。
5．將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到總蛋白。
6．上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
凍存樣本：
1．凍存組織樣本參照上述組織樣本步驟操作。
2．凍存細胞樣本中直接加入5-10倍體積的蛋白提取液，振蕩30分鐘。
3.在4℃，12000g條件下離心15分鐘。
4．將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到總蛋白。
5．上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
常見問題分析：
●蛋白濃度低？
處理部分組織樣本時可能沒有裂解完全，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。zuì好在持續振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
●用什么方法定量蛋白？
建議用BCA 法。不適合用Bradford 法，因為試劑A中含有干擾Bradford 法的組份，導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford 法定量。
● 提取時出現膠狀沉淀？
蛋白提取液處理產物中有時會出現少量透明膠狀物，屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。不檢測和基因組DNA 結合特別緊密的特定蛋白的情況下，可以直接離心取上清進行后續實驗即可；如果需要檢測和基因組結合特別緊密的核蛋白，則可以通過超聲處理，300w/10秒間隔10秒，超聲3分鐘，隨后
離心取上清用于后續實驗。
● 提取的蛋白具有活性嗎？
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結構，沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構象和活性。

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貨號	名稱	規格
WE0262	哺乳動物蛋白抽提試劑盒	25次|100次
SNM418	全蛋白提取試劑盒	50T
KFS070	10×WB洗滌液(TBS)	100ml
SY0356	4×Tris-HCl-SDS濃縮膠緩沖液，pH6.8	250ml
SY0368	0.5 M Tris-HCl緩沖液(pH 6.8)(無菌)	250ml
QN1151	AEC顯色試劑盒(20×)	1ml|10ml
QN1171	硝酸纖維素膜(NC膜)(0.45um)	30cm*3m

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名稱：強RIPA裂解液
貨號：BTN131006
規格：250mL
RIPA裂解液是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等實驗。本產品裂解強度較強，對膜蛋白、胞漿蛋白、核蛋白、胞漿磷酸化蛋白和各種轉錄因子均有很好的效果，本產品含有各種蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制劑，能有效防止各種蛋白酶對目的蛋白的降解。我公司各種RIPA裂解液產品特點見下表：

產品名稱	RIPA裂解液(強)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解強度	強	中	溫和
對膜蛋白的提取	很好	較好	一般
對胞漿蛋白的提取	很好	很好	很好
對核蛋白的提取	很好	較好	較好
胞漿磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
細胞核轉錄因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制劑	是	是	是
含磷酸酯酶抑制劑	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

儲存條件：低溫運輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

對于培養細胞樣品：
1. 融解RIPA裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鐘內加入PMSF，使PMSF的zuì終濃度為1mM。
2. 裂解細胞
2.1 對于貼壁細胞：去除培養液，用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后，細胞就會被裂解。
2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g離心3～5分鐘，取上清，即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意：通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。

對于組織樣品：
1. 把組織剪切成細小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鐘內加入PMSF，使PMSF的zuì終濃度為1mM。
3. 按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g離心3～5分鐘，取上清，即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
注意：RIPA裂解液的裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物，屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續實驗；如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續實驗。如果檢測一些常見的轉錄因子，例如NF-kappaB、p53等時，通常不必進行超聲處理，就可以檢測到這些轉錄因子。

備注：
1.為取得zuì佳的使用效果，盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。
2.裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品，建議使用BCA蛋白濃度測定試劑盒，不建議使用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。

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