SY0460 重組人胰島素
- 產品/服務：SY0460 重組人胰島素
- 型 號：SY0460
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-16
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1088
產品簡介
北京百奧萊博供應的重組人胰島素(11061-68-0)用于科研試驗，本產品質量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多重組人胰島素(11061-68-0)等蛋白質研究產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括重組人胰島素在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：重組人胰島素
英文名稱：Insulin, human recombinant
產品貨號：SY0460
產品規格：25mg|100mg|500mg
本品為基因重組技術制備的全長序列的人胰島素，分子量大約為5800 Da，結構與天然來源的人胰島素相同，常用作細胞培養的輔助成分，常見使用濃度為1-10 μg/ml。
胰島素（insulin）是胰腺中胰島β細胞分泌的一種雙鏈形式（α, β）的多肽激素，由51個氨基酸組成，其中α鏈包含21個氨基酸，β鏈包含30個氨基酸。兩條鏈間通過二對二硫鍵連接，而α鏈自身還含有一對二硫鍵。胰島素的分泌過程是：前胰島素原的氨基末端攜帶有一段23-30氨基酸的信號肽，該信號肽可將前胰島素原轉移至內質網，然后立即被切斷，釋放出胰島素原。胰島素原由胰島素β鏈、C-肽和α鏈組成，釋放出的胰島素原隨即被轉至高爾基體，在此被包裝并轉化成胰島素，與C-肽一同釋放至血液。
胰島素是目前已知的機體內能降低血糖的蛋白激素，不僅負責調控細胞對葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的攝入，利用和儲存，而且抑制糖原，蛋白質和脂肪的降解發生。不同物種胰島素功能大體相同，只是氨基酸組成上的差異。人胰島素結構見下：
來源：大腸桿菌
CAS：11061-68-0
分子式：C257H383N65O77S6
分子量：5807.57
外觀：白色精細粉末
活性（Potency）：≥27.5 USP U/mg
純度：95%-105%
鋅含量（Zinc Amount ）：≤1.0%（若實驗要求去除鋅離子，可將胰島素溶解在稀醋酸內，加入過量EDTA螯合鋅離子，然后等電點沉淀純化胰島素）
溶解性：不溶于中性pH水，溶于稀醋酸或稀鹽酸（pH 2-3）
等電點（pI）：pl = 5.3（天然蛋白）
序列：A-Chain: G-I-V-E-Q-C-C-T-S-I-C-S-L-Y-Q-L-E-N-Y-C-N
B-Chain: F-V-N-Q-H-L-C-G-S-H-L-V-E-A-L-Y-L-V-C-G-E-R-G-F-F-Y-T-P-K-T
儲存條件：-20℃干燥
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名稱：哺乳動物蛋白抽提試劑盒
貨號：WE0262
規格：25次|100次
本試劑盒能夠快速，溫和，的裂解哺乳動物細胞，有效提取細胞漿和細胞核蛋白。該試劑使用溫和配方保證所提取蛋白保持生物學活性并可應用于多種蛋白分析試驗，如：報告基因和酶活性測定，免疫檢測，蛋白純化等。提取后蛋白可采用BCA法進行蛋白定量分析。哺乳動物蛋白抽提試劑盒中帶有蛋白酶抑制劑混合物，可有效避免蛋白提取過程中蛋白的降解。
試劑盒組成：
| 組份 | 25次 | 100次 |
| Mammalian Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
保存條件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它組分：室溫
注意事項：
1、本產品可有效裂解細胞培養板培養的貼壁細胞(無需刮取)以及離心收集的懸浮細胞，較反復凍融或超聲法具有更高提取效率。但對于組織蛋白的抽提，建議使用組織蛋白抽提試劑盒(WE0260)。
2、表1中所列的是貼壁細胞蛋白提取的zuì佳使用量，先收集細胞可以減少試劑用量從而獲得更高的蛋白濃度。
3、也可以根據細胞數量估計抽提試劑的使用量。如2×106個Hela細胞約重20 mg，需要加入200μl抽提試劑。
4、通過本產品提取的蛋白，可通過BCA法進行蛋白定量分析。
使用方法：
貼壁細胞蛋白抽提
1、請在蛋白抽提前取出實驗所需Mammalian Protein Extraction Reagent進行預冷。
2、小心傾去貼壁細胞的培養液，使用PBS漂洗細胞。
3、加入適量Mammalian Protein Extraction Reagent(抽提蛋白前2-3分鐘按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)，在冰上用槍頭吹打貼壁細胞，將裂解液轉移至離心管中，冰上孵育20分鐘，讓細胞充分裂解(試劑使用量請參考附表1，冰上放置時間應根據細胞類型不同進行調整)。
4、14000×g離心5-10分鐘。
5、轉移上清液至新管中，用于進一步分析。
懸浮細胞蛋白提取
1、請在蛋白抽提前取出實驗所需Mammalian Protein Extraction Reagent進行預冷。
2、將懸浮細胞2,500×g，離心10分鐘，棄去上清。使用PBS漂洗細胞。2,500×g，離心10分鐘，棄去上清。
3、加入適量Mammalian Protein Extraction Reagent，抽提蛋白前2-3分鐘按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail，即1×工作液。
4、每100 mg細胞加入至少1ml 1×工作液。如提取的樣本量較大，可先使用少量1×工作液重懸細胞，然后加入剩余工作液。
5、吹打均勻后，冰上放置20分鐘，讓細胞充分裂解(冰上放置時間應根據細胞類型不同進行調整)。
6、14000×g離心15分鐘。
7、轉移上清至新管中，進行下一步分析。
附表1. 抽提試劑使用量推薦表
| 細胞培養板類型或平皿類型 | 抽提試劑使用量 |
| 100mm | 500-1000μl |
| 60mm | 250-500μl |
| 6孔培養板 | 200-400μl/孔 |
| 24孔培養板 | 100-200μl/孔 |
| 96孔培養板 | 50-100μl/孔 |
附表2. 常見問題及解決辦法
| 問題 | 可能原因 | 解決方法 |
| 低提取率 | 低蛋白表達量 | 優化轉染系統 |
| 試劑使用量不夠 | 增加抽提試劑使用量 | |
| 試劑無法溶解細胞膜 | 增加裂解時間或者加大晃動幅度 | |
| 無法獲得膜蛋白 | 更適合提取核漿蛋白 | 使用真核細胞膜蛋白抽提試劑盒 |
儲存條件：-20℃
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
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| SNM392 | DTT(二硫蘇糖醇) | 10g |
| SNM412 | 一步法植物活性蛋白提取試劑盒 | 20T |
| SNM416 | 膜蛋白和胞質蛋白提取試劑盒 | 50T |
| SNM424 | 高靈敏ECL發光檢測試劑盒 | 100ml |
| SNM453 | 蛋白上樣緩沖液(還原，5X) | 10ml |
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