YT273 雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒
- 產品/服務：YT273 雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒
- 型 號：YT273
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-16
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1037
產品簡介
北京百奧萊博供應的雙螢光素酶試劑盒用于科研目的，我公司的雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒
英文名稱：Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
產品貨號：YT273
產品規格：100次|1000次
本試劑盒是先以螢光素為底物來檢測螢火蟲螢光素酶，后以腸腔素為底物來檢測海腎螢光素酶，并且在后續加入海腎螢光素酶底物時，同時加入抑制螢火蟲熒光素酶催化luciferin發光的物質，使后續檢測僅僅檢測到海腎螢光素酶的活性，實現雙螢光素酶報告基因檢測。
試劑盒組分：
| 報告基因細胞裂解液 | 60ml |
| 螢火蟲螢光素酶檢測試劑 | 10ml |
| 海腎螢光素酶檢測緩沖液 | 10ml |
| 海腎螢光素酶檢測底物(100×) | 100μl |
螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61kD的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發出生物螢光。海腎螢光素酶是一種分子量約為36kD的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化coelenterazine氧化成coelenteramide，在coelenterazine氧化的過程中也會發出生物螢光。生物螢光可以通過化學發光儀或液閃測定儀進行測定。本試劑盒的檢測原理參考下圖。
雙螢光素酶的檢測原理圖。
通過螢光素酶和其底物這一生物發光體系，可以非常靈敏、地檢測基因的表達。通常把感興趣
基因的轉錄調控元件或5’啟動子區克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR區克隆在luciferase的下游等，構建成報告基因(reporter gene)質粒。然后轉染細胞，用適當藥物等處理細胞后裂解細胞，測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調控作用。Renilla luciferase相對更多地被用作轉染效率的內參，以消除細胞數量和轉染效率的差異。螢火蟲螢光素酶催化luciferin發光的zuì強發光波長為560nm。海腎螢光素酶催化coelenterazine發光的zuì強發光波長為465nm。
注意事項：
1. 加入海腎螢光素酶檢測工作液后對于上一步驟中的螢火蟲螢光素酶的抑制可以達到99%以上。但總會殘留微量活性，因此，宜在轉染時把海腎螢光素酶的表達量控制在其RLU讀數高于螢火蟲螢光素酶RLU讀數的10%。海腎螢光素酶的讀數高于螢火蟲螢光素酶的讀數是完全可以的，通常不會有明顯的負面影響。
2. 為取得zuì佳測定效果，在用單管的化學發光儀測定時，樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應盡量控制在相同的時間內，例如30秒內；使用具有化學發光測定功能的多功能熒光酶標儀時，宜先把樣品全部加好，然后統一加入螢火蟲螢光素酶檢測試劑。
3. 由于溫度對酶反應有影響，所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。
4. 為保證螢光素酶檢測試劑的穩定性，可以采取適當分裝后避光保存的方法，以避免反復凍融和長時
間暴露于室溫。經測試，反復凍融三次，對測定結果無明顯影響。
5. 樣品和測定試劑混合后，必須等待1-2秒，再進行測定。測定時間通常為10秒，根據情況也可以測定更長或更短時間，但是同一批樣品宜使用相同的測定時間。
6. 海腎螢光素酶檢測底物(100×) 配制在無水乙醇中。由于無水乙醇容易揮發，有時會在初次使用時發現體積明顯小于100μl的情況，此時用無水乙醇把體積補足至100μl，并混勻后即可使用。
7. 海腎螢光素酶檢測工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用，-20℃可以保存一周。隨著保存時間的延長檢測效果會不斷下降，因此不可配制成工作液后長期保存。
儲存條件：-20℃，有效期一年。
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名稱：雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒
貨號：KFS303
規格：100T
雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒，是先以螢光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲螢光素酶(Firefly luciferase)，后以腸腔素(coelenterazine)為底物來檢測海腎螢光素酶(Renilla luciferase)，并且在后續加入海腎螢光素酶底物時，同時加入抑制螢火蟲熒光素酶催化luciferin 發光的物質，使后續檢測僅僅檢測到海腎螢光素酶的活性，實現雙螢光素酶報告基因檢測。螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61kD 的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化luciferin 氧化成oxyluciferin，在luciferin 氧化的過程中，會發出生物螢光(bioluminescence)。海腎螢光素酶是一種分子量約為36kD 的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化coelenterazine 氧化成coelenteramide，在coelenterazine 氧化的過程中也會發出生物螢光。生物螢光可以通過化學發光儀(luminometer)或液閃測定儀進行測定。
注意事項
1.無菌操作。
2.熒光染料操作中注意避光進行。
3.由于溫度對酶反應有影響，所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。
4.為保證熒光素酶檢測試劑的穩定性，可以采取適當分裝后避光保存的方法，以避免反復凍融和長時間暴露于室溫。
5.螢火蟲熒光素酶檢測試劑、Renilla 熒光素酶檢測試劑zuì好現用現配。
6.細胞裂解液及裂解時間可根據細胞量適當增加、延長。
名稱：LXR-Luc熒光素酶報告基因質粒
貨號：SY0074
規格：1μg
LXR熒光素酶報告基因（報告基因質粒）（LXR luciferase reporter plasimd）是用于檢測LXRα轉錄活性水平為目的的報告基因。LXRα(liver X receptor α)轉錄因子核受體家族的成員之一。LXRα僅在肝臟、腎臟、小腸、肺、腎上腺和巨噬細胞中表達。LXRs(liver X receptor)參與機體多種生理活動的調節，包括膽固醇的代謝、脂肪的形成、糖原異生和炎癥等過程。
LXR報告基因主要用于檢測細胞中LXRα的轉錄活性、藥物研究以及基因過表達和RNAi的表型分析等。
pGMLXRα-Lu是我公司改造后的哺乳動物真核表達載體，在其多克隆位點插入了多個LXRα結合位點，可以高靈敏度地檢測LXRα的激活水平。同時，對載體中預測出的其它轉錄因子以外的結合位點進行了適當的突變，增加了質粒的轉錄因子結合特異性。由于質粒體積減小，使得LXR報告基因質粒更易于轉染。
質粒圖譜
注意事項
本質粒未經我公司允許不得用于任何商業用途，也不得移交給訂貨人實驗室以外的任何人或單位。
為了您的健康，實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。
使用說明
1.pGMLXRα-Lu可以采用常規轉染方法轉染哺乳動物細胞。用熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒進行檢測。
2.LXRα的激活劑，可作為LXR報告基因的陽性對照。
儲存條件：-20℃。
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| SY0059 | NF-κB螢火蟲熒光素酶報告基因質粒 | 1μg |
| SY0061 | STAT3螢火蟲熒光素酶報告基因質粒 | 1μg |
| SY0075 | KLF4-Luc熒光素酶報告基因質粒 | 1μg |
| SY0080 | HNF4-Luc熒光素酶報告基因質粒 | 1μg |
| SY0098 | p53-Luc熒光素酶報告基因質粒 | 1μg |
| SY0124 | ELK1-Luc熒光素酶報告基因質粒 | 1μg |
| SY0125 | ERRα-Luc熒光素酶報告基因質粒 | 1μg |
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