HR9079 組織活性氧檢測試劑盒(DCFHDA)
- 產(chǎn)品/服務(wù)：HR9079 組織活性氧檢測試劑盒(DCFHDA)
- 型 號：HR9079
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-08-28
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：1065
在激發(fā)波長488 nm，發(fā)射波長520 nm附近，使用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀、等檢測DCFHDA產(chǎn)物熒光，從而測定組織內(nèi)活性氧水平。一般最好使用新鮮組織樣本檢測活性氧，反映的是組織當(dāng)時(shí)的活性氧狀態(tài)。凍存的組織樣本的ROS在長期凍存過程中會(huì)損失掉，有條件的話就使用新鮮樣本，不建議使用凍存的樣本。已經(jīng)凍存的組織樣本中殘...
組織活性氧檢測試劑盒(DCFHDA)
產(chǎn)品編號：HR9079
產(chǎn)品組成：
|
組份 |
100T |
200T |
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組份A：勻漿緩沖液A |
100mL |
100mL×2 |
|
組份B：DCFHDA活性氧探針 |
100μL |
100μL×2 |
儲(chǔ)存條件：
勻漿液2-8℃保存；探針-20℃避光保存。有效期6個(gè)月。
【注】：
● 染料2周內(nèi)可2-8℃保存，長期不用可以-20℃保存。避免反復(fù)凍融。
● 探針為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短時(shí)間水浴。吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
組織活性氧檢測試劑盒(DCFHDA)產(chǎn)品簡介：
活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等，參與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程。
組織活性氧檢測試劑盒是一種利用熒光探針DCFHDA進(jìn)行組織活性氧檢測的試劑盒。本試劑盒中的DCFHDA ROS探針為綠色熒光的活性氧探針，具有488/520nm的最大激發(fā)/發(fā)射波長。
DCFHDA ROS探針在組織中活性氧存在的條件下，被氧化生成綠色熒光物質(zhì)，綠色熒光強(qiáng)度與組織內(nèi)活性氧水平成正比，檢測DCFHDA產(chǎn)物的熒光就可以知道組織內(nèi)活性氧的水平。
在激發(fā)波長488 nm，發(fā)射波長520 nm附近，使用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀、等檢測DCFHDA產(chǎn)物熒光，從而測定組織內(nèi)活性氧水平。
一般最好使用新鮮組織樣本檢測活性氧，反映的是組織當(dāng)時(shí)的活性氧狀態(tài)。凍存的組織樣本的ROS在長期凍存過程中會(huì)損失掉，有條件的話就使用新鮮樣本，不建議使用凍存的樣本。已經(jīng)凍存的組織樣本中殘余的ROS也可以用本試劑盒檢測。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
● 使用方便：可用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀檢測；
● 背景低，靈敏度高；
● 線性范圍寬，使用方便。
檢測方法：
● 熒光分光光度計(jì) ● 熒光酶標(biāo)儀
樣本類型：
● 新鮮組織 ● 凍存組織
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：
● 熒光分光光度計(jì)/熒光酶標(biāo)儀 ● PBS/HBSS(無酚紅) ● 蛋白定量試劑盒 ● 熒光檢測專用黑色96孔板
使用注意事項(xiàng)：
● 螺旋蓋微量管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。
● DCFHDA探針染色液為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)在室溫時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解，吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
● 使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進(jìn)行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。
● 盡量縮短探針標(biāo)記后到測定所用的時(shí)間，以減少各種可能的誤差。
使用方法：
試劑準(zhǔn)備：
根據(jù)樣本數(shù)量，用純水將DCFHDA探針10倍稀釋。充分混勻，備用。
【注】：
● 不可以一次性將探針全部稀釋。
● 現(xiàn)配現(xiàn)用。
組織活性氧檢測試劑盒(DCFHDA)樣本處理：
1、剛?cè)〉玫男迈r組織樣本用PBS洗凈。
2、準(zhǔn)確稱取50-100mg組織，加入1mL勻漿緩沖液A，用勻漿器/勻漿機(jī)充分勻漿。
3、在100×g，4℃離心3分鐘，棄沉淀，取上清。
樣本檢測：
1、在96孔板中加入190μL勻漿上清液、10μL DCFHDA探針，用移液器吹打，使之充分混勻。
2、在37℃避光孵育30分鐘。
3、置于熒光酶標(biāo)儀中，后于激發(fā)波長為488nm、發(fā)射波長530nm檢測熒光強(qiáng)度。
【注】：
● 或使用熒光分光光度計(jì)等其他熒光檢測設(shè)備。
● 必須使用熒光檢測專用的黑色96孔板。
● 如熒光強(qiáng)度太強(qiáng)，超過了儀器的檢測范圍，可將孵育后的勻漿上清液稀釋后再檢測。一般稀釋5-50倍。
蛋白定量：
1、另取50μL上清勻漿液，用PBS大約稀釋30倍。
2、取100μL進(jìn)行蛋白定量。
結(jié)果處理：
以熒光強(qiáng)度（RFU）/蛋白濃度（毫克蛋白）表示組織活性氧強(qiáng)度。
【注】：
● 數(shù)據(jù)與蛋白濃度的單位無關(guān)。
● 此處以蛋白濃度數(shù)據(jù)作為校正系數(shù)，對不同樣品進(jìn)行均一化處理。
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