HR8573 細胞膜染色試劑盒(深紅色)
- 產品/服務：HR8573 細胞膜染色試劑盒(深紅色)
- 型 號：HR8573
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-08-24
- 有效期至：長期有效
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M04細胞膜染色試劑盒是利M系列熒光探針進行細胞膜特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的M04細胞膜染色探針為綠色熒光標記的細胞膜探針，具有748/780nm的最大激發/發射波長。...
細胞膜染色試劑盒(深紅色)
產品編號：HR8573
產品組成：
|
組份 |
1000T |
5000T |
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組分A：細胞膜M04染料 |
500μL |
500μL×5 |
|
組分B：染料稀釋液 |
10mL |
50mL |
細胞膜染色試劑盒(深紅色)儲存條件：
染料-20℃避光保存，稀釋液2-8℃保存，有效期6個月。
【注】：
● 染料短期2周內可以2-8℃保存。染料長期不用可以-20℃保存。避免反復凍融。
● 染色液A為DMSO溶液，冬季氣溫較低時為凝固狀態，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短時間水浴。吸頭也需要放在培養箱預熱，否者容易再次凝固在吸頭內壁產生損耗。
產品簡介：
M04細胞膜染色試劑盒是利M系列熒光探針進行細胞膜特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的M04細胞膜染色探針為綠色熒光標記的細胞膜探針，具有748/780nm的最大激發/發射波長。
M系列探針是對活細胞的細胞膜進行選擇性染色的一類熒光染料，該系列探針可以選擇性標記細胞膜。當親脂性的綠色熒光探針M04進入細胞膜后，在整個細胞膜上擴散，最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。染色液M04在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強，被激發后可以發出紅色的熒光，具有很高的淬滅常數和激發態壽命。
熒光探針M04通常不會明顯影響細胞的活力，因此被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑（long-term tracer）。除了最簡單的細胞膜熒光標記外，還可以用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching）檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
M系列細胞膜探針具有多種顏色可以選擇，可根據情況對樣品進行多色標記實驗。除了本試劑盒的深紅色熒光探針，還可以提供綠色、橙色等顏色的染色試劑盒。
以96孔板每孔200μL染色液計，本試劑盒小包裝可以染色1000-5000個樣本。
細胞膜染色試劑盒(深紅色)檢測方法：
● 流式細胞儀 ● 熒光顯微鏡 ● 激光共聚焦
樣本類型：
● 懸浮細胞 ● 貼壁細胞
試劑盒以外自備儀器和試劑耗材：
● 激光共聚焦/熒光顯微鏡 ● PBS緩沖液 ● 或者HBSS(不含酚紅)
使用注意事項：
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體收集至管底，避免開蓋時液體灑落。
● M04染色液為DMSO溶液，冬季氣溫較低時在室溫時為凝固狀態，極易粘附在管壁、吸頭壁。
注意需要加熱溶解，吸頭也需要放在培養箱預熱，否者容易再次凝固在吸頭內壁產生損耗。
● 使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。
● 細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
● 標記的條件因細胞種類而異，根據不同樣本的實際染色結果做相應調整，在每次實驗前，請先根據不同的實驗要求、細胞類型、細胞的膜通透性等進行優化，確定最佳條件。以下方法僅供參考。
● 染色后立即進行分析。
● 本染色液可用于細胞涂片、細胞的檢測。
使用方法：
1、染色工作液的配制：
根據樣本數量，用37℃培養箱預熱染料稀釋液試劑B將M04 熒光染料10倍稀釋。再用HBSS或相應的無血清培養基或其他緩沖液將探針M04進行40-200倍稀釋，配制成染色工作液。
【注】：
● 也可以不使用本試劑盒中的試劑B，直接用HBSS等緩沖液或相應的無血清培養基稀釋M04染料至所需濃度。
● 開始實驗前，使用HBSS緩沖液或無血清培養基稀釋染料儲存液到需要的工作濃度。工作濃度應根據不同細胞的預實驗結果確定的最佳工作濃度，建議至少在超過10倍范圍的濃度下進行測試。一般染色終濃度為試劑盒中染料母液的400-2000倍稀釋，1000-2000倍適合大多數細胞樣本。
● 建議收到產品后，根據單次使用量，對母液進行小量分裝，每次使用一管，試劑-20℃避光凍存，一年穩定。
● 工作液現配現用。
● 為了降低探針加載過度可能引起的假陽性，建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。
● 若細胞在染色后于不含染料的培養基中孵育，熒光信號會衰減。
2、細胞染色
懸浮細胞染色
1) 用PBS洗滌細胞2次。
【注】：
● 500×g離心5分鐘。
2) 加入適量體積的染色工作液重懸細胞，使其密度大約為1×106/mL。
3) 在37℃孵育細胞5～120分鐘，不同的細胞最佳培養時間不同。可以用20分鐘作為起始孵育時間，之后優化體系以得到均一的標記結果。
【注】：
● 若染色不夠充分，建議增加染料濃度或延長染色時間。
4) 孵育結束，500×g離心5分鐘。
5) 傾倒上清液，再次緩慢加入37℃預熱的培養基重懸細胞。
6) 重復（4），（5）步驟兩次以上。
貼壁細胞染色
1) 用PBS洗滌細胞2 次。
2) 細胞培養板中或細胞爬片上加入適量體積的染色工作液。
【注】：
● 96孔細胞培養板每孔加入100μL染色液即可。
3) 37℃孵育細胞5～120分鐘，不同的細胞最佳培養時間不同。可以用20分鐘作為起始孵育時間，之后優化體系以得到均一的標記結果。
【注】：
● 若染色不夠充分，建議增加染料濃度或延長染色時間。
4) 吸干染色工作液，用培養液洗培養板或蓋玻片2～3次，每次用預熱的培養基覆蓋所有細胞，孵育5～10分鐘，然后吸干培養基。
3、用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測
激發波長為748nm，最大發射波長為780nm。
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