HR9105 細(xì)菌活性氮(RNS)檢測(cè)試劑盒(紅色,O09)
- 產(chǎn)品/服務(wù)：HR9105 細(xì)菌活性氮(RNS)檢測(cè)試劑盒(紅色,O09)
- 型 號(hào)：HR9105
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-08-24
- 有效期至：長(zhǎng)期有效
- 瀏覽次數(shù)：882
細(xì)菌活性氮(RNS)檢測(cè)試劑盒(紅色,O09)是一種利用熒光探針O09進(jìn)行活性氮檢測(cè)的試劑盒。O09探針可自由透過(guò)細(xì)菌細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的RNS氧化，產(chǎn)生紅色熒光物質(zhì)，并穩(wěn)定存在于細(xì)菌胞內(nèi)。根據(jù)細(xì)菌細(xì)胞中紅色熒光的產(chǎn)生和強(qiáng)弱，可以判斷細(xì)菌細(xì)胞RNS含量的變化情況。...
細(xì)菌活性氮(RNS)檢測(cè)試劑盒(紅色,O09)
產(chǎn)品編號(hào)：HR9105
產(chǎn)品組成：
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組份 |
100T |
200T |
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組分A：O09熒光探針 |
200μL |
200μL×2 |
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組分B：10×探針稀釋液 |
10mL |
20mL |
儲(chǔ)存條件：
探針-20℃，避光保存；稀釋液2-8℃保存。有效期6個(gè)月。
【注】
● 探針短期內(nèi)經(jīng)常使用可以2-8℃保存。長(zhǎng)期不用-20℃保存。
● 避免反復(fù)凍融。可以根據(jù)需要分裝后凍存。
● 染色液A為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短時(shí)間水浴。吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
細(xì)菌活性氮(RNS)檢測(cè)試劑盒(紅色,O09)產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
細(xì)菌活性氮(RNS)檢測(cè)試劑盒(紅色,O09)是一種利用熒光探針O09進(jìn)行活性氮檢測(cè)的試劑盒。O09探針可自由透過(guò)細(xì)菌細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的RNS氧化，產(chǎn)生紅色熒光物質(zhì)，并穩(wěn)定存在于細(xì)菌胞內(nèi)。根據(jù)細(xì)菌細(xì)胞中紅色熒光的產(chǎn)生和強(qiáng)弱，可以判斷細(xì)菌細(xì)胞RNS含量的變化情況。
在激發(fā)波長(zhǎng)516nm，發(fā)射波長(zhǎng)606nm附近，使用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀等可檢測(cè)熒光強(qiáng)度的設(shè)備，可以方便測(cè)定熒光情況，從而測(cè)定細(xì)菌胞內(nèi)活性氮水平。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
● 使用方便：可用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè)；
● 背景低，靈敏度高；
● 線性范圍寬，使用方便。。
檢測(cè)方法：
● 熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀 ● 流式細(xì)胞儀 ● 熒光顯微鏡 ● 激光共聚焦
樣本類型：
● 各種革蘭氏陽(yáng)性、陰性細(xì)菌
試劑盒以外自備試劑和儀器
● 熒光分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀，激發(fā)波長(zhǎng)516nm，發(fā)射波長(zhǎng)606nm。
● 移液器 ● 離心機(jī) ● PBS ● 或者HBSS
使用注意事項(xiàng)：
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
● 熒光探針標(biāo)記后，一定要洗凈殘余的未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的探針，否則會(huì)導(dǎo)致背景較高。
● 探針標(biāo)記完畢并洗凈殘余探針后，可以進(jìn)行激發(fā)波長(zhǎng)的掃描和發(fā)射波長(zhǎng)的掃描，以確認(rèn)探針的標(biāo)記情況是否正常。
● 盡量縮短探針標(biāo)記后到測(cè)定所用的時(shí)間，以減少各種可能的誤差。
● O09在光照和空氣中易被氧化，注意避光密封保存。
● 對(duì)不同的細(xì)菌樣本，應(yīng)選擇合適的孵育時(shí)間和濃度，以觀察RNS的變化。應(yīng)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)情況調(diào)整染色濃度和時(shí)間。
細(xì)菌活性氮(RNS)檢測(cè)試劑盒(紅色,O09)使用方法：
O09探針工作液配制：
1、根據(jù)樣本數(shù)量，用純水將探針稀釋液B進(jìn)行10倍稀釋。
2、根據(jù)樣本數(shù)量，用10倍稀釋過(guò)的探針稀釋液B 將探針進(jìn)行1000倍稀釋。即配成染色工作液。
【注】:
● 工作液濃度應(yīng)根據(jù)不同細(xì)菌的預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定的最佳工作濃度，建議至少在超過(guò)10倍范圍的濃度下進(jìn)行測(cè)試。一般染色終濃度500-5000倍稀釋，1000-2000倍適合大多數(shù)細(xì)菌樣本。
● 建議收到產(chǎn)品后，根據(jù)單次使用量，對(duì)母液進(jìn)行小量分裝，每次使用一管，試劑-20℃避光凍存，一年穩(wěn)定。
● 工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
● 如果用不完，不可以一次性將探針全部稀釋。
O09探針標(biāo)記：
1、準(zhǔn)備1mL 新鮮待測(cè)菌液。
【注】:
● 大約1×108細(xì)胞/mL。
● 根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要，看是否需要細(xì)胞計(jì)數(shù)。采用絕對(duì)計(jì)數(shù)或者OD600-660 比濁均可。
2、將待測(cè)細(xì)菌樣本離心收集菌體。
3、用PBS 洗滌菌體2-3次。離心收集菌體沉淀。
4、用500μL-1mL 染色工作液重懸菌體。
5、在37℃避光孵育30分鐘。
6、孵育結(jié)束后，離心收集菌體。
7、用PBS清洗細(xì)胞一次。離心收集菌體。
8、用500μL PBS重懸菌體。充分混勻。
9、取200μL加入熒光檢測(cè)用96孔板。
10、置于酶標(biāo)儀中，后于激發(fā)波長(zhǎng)為516nm、發(fā)射波長(zhǎng)606nm檢測(cè)熒光強(qiáng)度。
結(jié)果處理：
熒光強(qiáng)度強(qiáng)表示細(xì)菌活性氮強(qiáng)度高。
【注】：
● 熒光強(qiáng)度強(qiáng)則活性氮（RNS）含量高。
● 可以用實(shí)驗(yàn)中對(duì)照樣本的熒光強(qiáng)度值為基準(zhǔn)，待測(cè)組樣本的熒光強(qiáng)度值占對(duì)照樣本的百分比來(lái)比較活性氮（RNS）程度差異。
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