RFT010 50bp plus DNA la
- 產品/服務：RFT010 50bp plus DNA la
- 型 號：RFT010
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：988
產品簡介
50bp plus DNA la是高品質的核酸電泳和回收產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于科學研究，我公司的50bp plus DNA la品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括50bp plus DNA ladder(50～1000bp)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：50bp plus DNA ladder(50～1000bp)
產品貨號：RFT010
產品規格：100T(2×250μl)
本產品是由11條帶狀雙鏈DNA條帶組成的即用型DNA Ladder，適用于瓊脂糖凝膠電泳中DNA條帶的分析。含有1×loading buffer，可根據實驗需要，直接取2-5μl電泳，使用方便，電泳圖像清晰。11條帶包括50，100，150，200，250，300，350，400， 500， 600，1000bp，其中300bp條帶約為100ng/5μl，其余條帶濃度大約50ng/5μl。
使用方法：
1. 取2-5μl本產品加入到瓊脂糖凝膠的加樣孔中(每1mm×1mm加樣孔加1μl，如果加樣孔寬于5mm，可以適當增加上樣量)就行電泳。
2. 建議電泳條件：凝膠濃度為2.0-2.5％，凝膠長度6-7cm，電泳電壓4-10v/cm，電泳時間45-50分鐘。
3. 通過EB染色后紫外燈下觀察條帶。
注意事項：
1. 瓊脂糖的質量對DNA的電泳有很大影響，電泳時請盡量使用質量優等的瓊脂糖。
2. 請使用新鮮配制的電泳緩沖液和新鮮配制的瓊脂糖凝膠進行電泳，以保證Marker良好的分離效果。
3. 如果凝膠中預先加入EB，電泳結束后紫外燈下觀察，200bp以下條帶亮度較弱，此問題可以通過凝膠后染的方法解決(即溶膠時不加EB，電泳結束后再進行EB染色)。
儲存條件：-20℃，有效期1年。
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規格：250mL
TAE Buffer全名為Tris-acetate-EDTA buffer，它主要用于DNA的瓊脂糖電泳。跟TBE相比，它的特點是不含硼酸，不會影響連接等后續酶反應。此外含低鹽，所以可用于研究鹽對DNA電泳速度的影響。但其緩沖能力低于TBE，反復使用的次數少于TBE。線性雙鏈DNA的泳動速度快于TBE。
儲存條件：常溫運輸及保存、有效期一年。
名稱：超快核酸電泳液(干粉)
貨號：BTN51210
規格：50L
SuperBuffer-2是我司在SuperBuffer基礎上開發的DNA/RNA 兩用快速電泳液。它跟SuperBuffer一樣，能以高達30 V/cm的電壓電泳，達到快速電泳的目的。跟SuperBuffer 不同的是，本產品對鹽離子濃度敏感度低，同時還能用于RNA電泳。
產品特點：
1.快速，電泳時間短，對分辨率要求不高的電泳(如PCR和酶切檢測等)甚至可以在5-10分鐘內完成。
2. 不影響后續的Southern雜交，DNA膠回收和DNA連接等反應。
3. 價格與TBE(干粉)相當甚至更。
4. DNA膠回收率高于使用TAE和TBE電泳的膠回收。
儲存條件：常溫保存和運輸，有效期兩年。
使用方法：
一：溶液的配制
將本產品全部加到一個干凈的容量適當的容器中，按下表的用量加入蒸餾水并在室溫下用磁力攪拌器攪拌，直到干粉完全溶解(一般需要30分鐘左右)。
配法一(配制20X濃縮液)：加2.5升得到20×工作液
配法二(直接配制工作液)：加水50升得到50×工作液
注：其他濃度的濃縮液配制可以按比例計算，但濃縮液濃度不能超過20×，否則干粉不能全部溶解。由于干粉含多種未徹底混合均勻的成份，所以必須一次性全部用于溶液的配制。如果緩沖液(濃縮液或工作液)長時間不用，zuì好滅菌后放4℃長期保存。
二：DNA電泳
將SuperBuffer-2濃縮液用蒸餾水稀釋到1×，除了需要使用較高電壓才能得到快速的電泳結果外，操作跟使用TAE和TBE基本一樣。需注意的地方是：
1.電壓：在SuperBuffer-2溶液中既可以使用常規電壓，也可以使用較高電壓，只是使用常規電壓時，其快速的優越性就體現不出來。使用較高電壓時，由于各電泳槽結構不同，zuì佳電壓需要稍做摸索。次zuì好將工作電壓調到zuì高電壓的80%左右，即平均25 V/cm(電距離)。對一般minigel，一般可以用250-350V 跑5-10分鐘；對大的電泳槽，可用400-450V 跑5-10分鐘。每次根據電泳結果和緩沖液溫度決定各電泳槽的zuì佳工作電壓和時間。一般電壓越高，電泳時間越短。若在電泳時發生電流或電壓逐漸下降的現象，請檢查電泳儀是否設置了電流上限或功率上限。緩沖液電泳次數超過3次或緩沖液中有細菌/真菌生長也會出現此現象，需要更換新的緩沖液。
2.膠濃度：建議將瓊脂糖凝膠的濃度控制在0.8%左右，對于長度在100bp以下的DNA片段，可以將瓊脂糖凝膠的濃度提高到1.2%左右。由于每次溶膠過程中會丟失水份，所以zuì好在溶膠后適當補充水份(可以前后稱重)，否則膠濃度會逐漸增加，DNA的移動速度會減低、產熱會增加。使用0.8%左右的瓊脂糖凝膠的好處是一方面可以節約膠的用量，另一方面可以使DNA的泳動速度更快，同時還能夠提高DNA的回收率。
3.染色：如果使用EB，zuì好把染料加入到融化后的凝膠中(只是EB的終濃度zuì好為0.4 -0.5μg/mL，比使用TAE和TBE時稍高)，但也可以加入到電泳緩沖液中或/和電泳上樣液中。如果使用百奧萊博低毒染料綠如藍，zuì好將染料加入到融化后的凝膠中。如果只有膠中有染料，則長時間電泳后(超過20分鐘)，大部分染料在高壓下會與DNA 分離，DNA 條帶可能會看不見或看起來很淡，此時應該再染色一次。在染色液中加入一定的量的NaCl(終濃度≥0.05 mol/L)能提高染色效果。SuperBuffer-2與SYBR Green I 也有良好的兼容性，可以結合使用。
4. DNA 條帶扭曲：DNA樣品中所含SDS 量過高時(SDS 主要來于上樣液)，DNA條帶將出現扭曲，影響實驗效果。建議使用不含SDS的上樣液。
5. 反復使用：1×SuperBuffer-2電泳液至少可以重復使用2-3次，如果使用大電泳槽，可以重復使用的次數會更多。
6. TAE和TBE膠：已經用TAE和TBE電泳液配置好的瓊脂糖凝膠可以直接放入1× SuperBuffer-2電泳液中按上述電泳條件電泳，但有時候會有扭曲現象。
三：RNA電泳
跟DNA電泳一樣，必須在使用前用水將SuperBuffer-2溶液稀釋到1×，其使用方法跟DNA電泳的主要區別是：
1.電壓：RNA電泳時，zuì高使用電壓大約只有DNA zuì高使用電壓的一半左右，所以一般minigel可以使用150 V左右的電壓。由于各實驗室電泳槽規格各異，次電泳時，zuì好將工作電壓調到跟MOPS電泳一樣的電壓，每次再逐漸往上調電壓和時間，根據電泳結果和測定緩沖液的溫度決定今后的工作電壓。
2. RNA上樣液：RNA必須與含變性劑的RNA上樣液混合，并在80℃保溫10分鐘后冰浴2-5分鐘再上樣。不能直接將RNA樣品上樣或使用DNA上樣液，否則電泳不但很難得到清晰的條帶，并且在加樣孔中還會有看似DNA污染的條帶出現。推薦使用百奧萊博生產的RNA變性/上樣/染色三合一即用型溶液RNAload。
3.膠濃度：RNA電泳zuì好使用1%-1.5%的瓊脂糖凝膠，用1X SuperBuffer-2配制。
4.染色：同DNA電泳。
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