QN1056 20×SSC緩沖液,PH7.4

產品簡介
20×SSC緩沖液,PH7.4是高品質的克隆與表達產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于科研試驗,20×SSC緩沖液,PH7.4是我司眾多優質克隆與表達之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括20×SSC緩沖液,PH7.4在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:20×SSC緩沖液,PH7.4
英文名稱:saline sodium citrate
產品貨號:QN1056
產品規格:100mL|500mL
本品常用于Southern blot、DNA電泳等分子生物學實驗。
儲存條件:常溫
根據您的關注的20×SSC緩沖液,PH7.4,您可能還對以下產品有需求:
名稱:大腸桿菌BL21-Co
貨號:BTN140378
規格:10*100μl
本產品來源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,從而減少對重組蛋白的降解,補充大腸桿菌缺乏的4 種稀有密碼子(AGA、AUA、CCC、CUA)對應的tRNA(argU、ileY、proL、leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系統中的表達水平。該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3 區(DE3 區含有T7 噬菌體RNA聚合酶),可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等質粒的蛋白表達,同時具有四環素,氯霉素,鏈霉素,壯觀霉素抗性。本產品由特殊工藝制作,經pUC19質粒檢測轉化效率高達108cfu/μg。
菌株基因型為:F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。
儲存條件:干冰運輸、-80℃保存,有效期半年。
自備試劑:目的DNA、SOC或LB培養基等
使用方法:
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl,可以根據實際情況分裝使用。
以下實驗以100μl感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA 所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm 振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含有相應抗生素的LB 固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。
注意事項:
1、涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多,可取少量轉化產物涂布平板;若轉化的DNA 總量較少,可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少,可通過離心(4,000rpm ,2分鐘)后吸除部分培養液,懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養基不易涂干,可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉化菌落數過少,可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。
4. 誘導時,IPTG濃度可選(0.1-2mM 均可)。
5. 為獲得需要量的蛋白,zuì佳誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優化。
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