GL1504 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液
- 產(chǎn)品/服務(wù)：GL1504 常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液
- 型 號：GL1504
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-06
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：952
產(chǎn)品簡介
常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品，本制品用于生化實驗研究等領(lǐng)域，我公司專注于蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液質(zhì)量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液
產(chǎn)品貨號：GL1504
產(chǎn)品規(guī)格：100ml|500ml
用途：
考馬斯亮藍(lán)染色凝膠
注意事項：
主要由乙酸等組成。
儲存條件：室溫，12個月
根據(jù)您的關(guān)注的常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：
名稱：動植物膜蛋白微量制備試劑盒
貨號：BTN91204
規(guī)格：50次
細(xì)胞膜蛋白質(zhì)參與了很多重要的細(xì)胞活動，根據(jù)它們與膜結(jié)合的位置一般分為兩種，一種是附著在細(xì)胞膜上，另一類是嵌入到細(xì)胞膜中間。附著型膜蛋白疏水性較弱，比較容易提取和純化；而嵌入型膜蛋白疏水型很強，所以在水溶液里面很難溶解，非常難以提取和純化。百奧萊博根據(jù)上述特點，經(jīng)過精心優(yōu)化的、開發(fā)出本產(chǎn)品，專門用于分離純化這兩種膜蛋白。
產(chǎn)品特點：
1. 兩步法提取，先純化含膜組分，再分離附著型膜蛋白和嵌合型膜蛋白。
2. 膜蛋白(附著型+嵌入型)產(chǎn)量高，對肝臟組織而言，其線粒體膜蛋白產(chǎn)率為10μg/mg左右，過氧化物酶體為1μg/mg左右，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)為25-30μg/mg。
3. 所得的膜蛋白大部分具有生物活性，可用于活性研究。
4.可用動物、植物培養(yǎng)細(xì)胞和實體細(xì)胞為材料，也可用預(yù)先純化的含膜組分或細(xì)胞器(如線粒體、葉綠體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、過氧化物酶體)為材料(本試劑盒不含純化細(xì)胞器的試劑)。
5. 本方法重復(fù)性好。
6. 本試劑盒足夠50次微量提取，分A型和B型兩種。A型用于附著型膜蛋白，B型用于嵌合型膜蛋白和附著型膜蛋白。
試劑盒組成：
| 成分 | A型 | B型 |
| 溶液A | 100ml | 100ml |
| 溶液B | 10ml | 10ml |
| 溶液C | 50ml | 100ml |
| 說明書 | 1份 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。
使用方法：
1. 對培養(yǎng)細(xì)胞：收集1×107個培養(yǎng)細(xì)胞(動物細(xì)胞、植物細(xì)胞)，用20mL自備的冰浴的PBS 洗滌三次，每次洗滌后需要4℃下1000 g離心2分鐘，然后小心棄上清。對實體組織：由于各種動植物的各種實體組織的屬性差別太大，故本手冊的純化膜組分的操作步驟(第1-7 步)不一定完全適合，用戶需要自行優(yōu)化以純化含膜組分或含膜的細(xì)胞器(如細(xì)胞質(zhì)膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、葉綠體等)，再將含膜組分或細(xì)胞器沉淀直接用于第8 步的膜蛋白提取。
2. 將洗滌后的細(xì)胞沉淀重懸在2mL溶液A中，冰上靜置10分鐘。注意：膜蛋白有膜的保護，在純化過程中對蛋白酶的降解沒有胞漿蛋白敏感，一般可以不加蛋白酶抑制劑。但如果純化的膜蛋白的確有降解的話，可以在溶液A中加入自備的蛋白酶抑制劑混合物。
3.轉(zhuǎn)移到容積為2mL的Dounce 玻璃勻漿器上下勻漿20-50次(具體次數(shù)取決于細(xì)胞種類，293T細(xì)胞一般需要20次左右，而MEF細(xì)胞一般需要50次左右。zuì好用樣品行預(yù)實驗以摸索zuì佳勻漿次數(shù)，zuì佳勻漿次數(shù)時在顯微鏡下能看見細(xì)胞破裂但細(xì)胞核完整)。
4. 將勻漿液轉(zhuǎn)移到15或50mL塑料管中，加入相當(dāng)于勻漿液體積1/10的溶液B，其間可以輕柔顛倒混勻3-5次，留少量樣品作為對照1(勻漿液)。
5. 4℃ 2500rpm離心20分鐘，沉淀為細(xì)胞核，上清為胞漿和膜成分，留少量樣品作為對照2(胞漿和膜成分)。
6. 將上清液用Beckman Optima 臺式超速離心機100,000 g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機，但離心力應(yīng)該為100,000g，否則有可能得不到膜成分沉淀。
7.小心轉(zhuǎn)移上清(胞漿部分)并留少量樣品作為對照3(胞漿)。
8. 將沉淀(含膜組分)重懸于1mL 冰浴的溶液C中后，冰上靜置30分鐘，留少量樣品作為對照4(膜成分)。本成分電泳前，需要先用自備的TCA沉淀(TCA 終濃度為10%)，再用冰冷的丙酮洗滌兩次后再溶解在1×上樣液中待用。對照1-3 號不需要這樣的預(yù)處理。
9. 用Beckman Optima 臺式超速離心機100,000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機，但離心力應(yīng)該一致，否則有可能得不到沉淀。
10. 如果需要附著型膜蛋白，則取上清(含附著型膜蛋白)棄沉淀(含膜和其中的嵌合型膜蛋白)。上清可以放-20℃長期保存，如果需要電泳，需要先用自備的TCA沉淀(TCA 終濃度為10%)，再用冰冷的丙酮洗滌兩次后再溶解在1×上樣液中與對照1-4 號一起上樣電泳。
11. 如果需要嵌合型膜蛋白，則取出上清(含附著型膜蛋白)并留少量樣品作為附著型膜蛋白樣品，然后再用1mL 冰浴的溶液C重懸沉淀，然后100,000g 4℃離心60分鐘，去掉上清(上清含殘留的附著型膜蛋白，可以留樣作為洗滌后的附著型膜蛋白樣品)。沉淀含膜和其中的嵌合型膜蛋白。如果需要測定膜蛋白的濃度，則將其溶解在自備的0.5 M NaOH溶液。
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