RFT049 高分子量蛋白Marker
- 產(chǎn)品/服務(wù)：RFT049 高分子量蛋白Marker
- 型 號：RFT049
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-05
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：876
產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應(yīng)的高分子量蛋白Marker用于科學(xué)研究，我公司的高分子量蛋白Marker品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括高分子量蛋白Marker(43～200KD)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：高分子量蛋白Marker(43～200KD)
英文名稱：High Molecμlar Weight Protein Marker
產(chǎn)品貨號：RFT049
產(chǎn)品規(guī)格：20T(100μl)
本產(chǎn)品包含5種蛋白質(zhì)混合物，分子量范圍為43kD-200kD，經(jīng)過SDS-PAGE電泳，用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到分布均勻密度相近的5條帶，可以用來判斷SDS-PAGE電泳后蛋白質(zhì)的分子量。
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使用說明：
1、取Marker樣品室溫融化，徹底混勻，離心快甩將樣品收集到管底。
2、95℃處理5分鐘后立即上樣電泳。
注：
a.一次熱處理后，未用盡樣品-20℃保存；下次使用時只要室溫完全融化混勻后即可上樣，不用再加熱處理。
b.上樣量根據(jù)膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說來，0.75mm×5mm(厚度×寬度)的加樣孔上樣5μl，其他規(guī)格梳子請適當(dāng)調(diào)整上樣量。
3、電泳結(jié)束后，染色，觀察結(jié)果。
注：使用銀染時，由于靈敏度高于考馬斯亮藍(lán)染色方法，可以適當(dāng)降低Marker上樣量。
儲存條件：-20℃，有效期6個月。
根據(jù)您的關(guān)注的高分子量蛋白Marker(43～200KD)，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：
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BTN100908A 一站式長效期SDS-PAGE套裝A(>30KD) 30次
YT628 蛋白質(zhì)Ladder(10-200kD) 100μl
WE0310 TBST(pH8.0,10×) 500ml
WE0313 TBS(pH8.0,10×) 500ml
SNM419 顯影定影試劑盒 100ml
KFS070 10×WB洗滌液(TBS) 100ml
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名稱：石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒
貨號：BTN130888
規(guī)格：50次
石蠟包埋組織是很重要的臨床材料，研究其正常細(xì)胞和疾病相關(guān)的細(xì)胞，特別是癌細(xì)胞中標(biāo)記蛋白的差異表達(dá)水平，對于判斷癌化的進展，癌癥的類型的判定，以方便于診斷和治療有重要的意義，然而體外培養(yǎng)的細(xì)胞的蛋白差異表達(dá)水平并不能夠真實反映體內(nèi)細(xì)胞的真實狀況，因此從石蠟包埋組織中提取蛋白并且加以研究有很重要的意義，本試劑盒通過特殊的快速脫蠟試劑和蛋白質(zhì)抽提試劑，在兩種不同的溫度條件下溫育，可以將被鉸鏈的蛋白質(zhì)釋放出來，經(jīng)過簡單的離心步驟，上清中含有的蛋白經(jīng)過沉淀洗滌和溶解后，可以用于Western Blot 、SDS-PAGE、ELISA、2D電泳或蛋白質(zhì)芯片分析等，本試劑盒可以使用50次左右。
產(chǎn)品特點：
1. 不含有去污試劑，適用于非染色的標(biāo)本。
2.可以適用于甲醛浸泡的組織標(biāo)本。
3. 不需要超速離心，可以同時處理多個標(biāo)本。
試劑盒組成：
| 成份 | 規(guī)格 |
| 預(yù)處理試劑A | 100mL |
| 預(yù)處理試劑B | 5mL |
| 提取試劑 | 5mL |
| 沉淀試劑 | 75mL |
| DTT干粉 | 80mg |
| 使用手冊 | 1份 |
儲存條件：常溫下運輸和保存，但DTT和提取試劑需要4℃保存，盛裝預(yù)處理試劑A的瓶子已經(jīng)密封，請在使用后，將剩余的預(yù)處理試劑A倒入一個有內(nèi)蓋的瓶中，同時蓋緊內(nèi)外蓋，以防止揮發(fā)。盛裝預(yù)處理試劑A，B和沉淀試劑的瓶蓋要蓋緊，同時避免火源。
使用方法：
1. 取兩塊大約10-15μm厚，100mm2石蠟包埋組織切片到1.5mL的干凈離心管中，加入1mL預(yù)處理試劑A，高速渦懸震蕩30 sec，室溫靜置5 min，期間偶爾顛倒離心管數(shù)次。
2. 加入100μL預(yù)處理試劑B，渦懸震蕩10sec，再10000rpm(10000g)離心2min，移去上下兩層的液體。
3. 用500μL的超純水清洗脫蠟的組織兩次，離心并盡量吸去液體，保留組織塊沉淀。
4. 加入100μL提取試劑(用前需要將DTT全部加入到裝提取試劑的瓶中，搖晃混勻，未用完的提取試劑需要4℃放置)，蓋上蓋子，渦懸震蕩數(shù)秒。
5.在水浴鍋中100℃加熱20 min，短暫離心一下，再用組織研磨棒將切片組織磨碎。
6.在水浴鍋中60℃加熱2 hour，期間大約每20 min取出，震蕩一次。
7. 4℃，12000rpm(12830 g)離心15 min，小心將上清轉(zhuǎn)移到一個新的1.5mL的干凈離心管中。注意：在上清中的蛋白質(zhì)可以在4℃的環(huán)境條件下保存一個星期，如果需要長期保存，請放置在-20℃的環(huán)境中，同時避免 反復(fù)凍溶，也可以使用我公司生產(chǎn)的非干擾型蛋白濃度測定試劑盒對上清中的蛋白質(zhì)直接定量。
8. 加入1mL的沉淀試劑，渦懸震蕩10 sec，在4℃的環(huán)境中保持10 min。
9. 4℃，12000rpm離心15 min，去除上清，保留沉淀。
10. 加入0.5mL的沉淀試劑，渦懸震蕩10 sec，在4℃的環(huán)境中保持10 min，再4℃，12000rpm離心15 min，去除上清，保留沉淀，在通風(fēng)櫥中將試管倒置在濾紙上，讓殘余的液體揮發(fā)干凈。
11. 將固體沉淀溶解于合適的自備的緩沖液中，再4℃，12000rpm離心5 min，收集上清，用于SDS-PAGE，Western blot等實驗。注意：此上清中含有DNA，RNA 殘留，所以溶液有些發(fā)粘，加入少量的micrococcal nuclease，benzonase等消化，有助于減少粘性，但是即使不處理一般不會影響后續(xù)實驗，用槍頭將沉淀搗碎。建議使用含有Thiourea ，Urea，NDSB-201或其它強溶解能力的去污試劑的緩沖液有利于沉淀的完全溶解。
注意事項：
1. 為提高石蠟包埋組織中蛋白質(zhì)的回收效率，必須盡量減少在切片制作過程中甲醛固定時間，同時在石蠟包埋前徹底脫水，甲醛固定的時間越長，蛋白質(zhì)的提取回收效率越低。
2. 盡量取用從石蠟包埋組織塊中切取的薄片，或沒有封閉到載玻片上的沒有經(jīng)過蘇木精等染色的切片。
3. 材料越新鮮或甲醛固定時間越短，蛋白質(zhì)的回收效率越高。
4. 提取試劑中含有含有刺激性的化合物，操作時要戴好乳膠手套，避免沾染皮膚、眼睛和衣服，防止吸入口鼻，沾染皮膚 眼睛后，立即用清水或生理鹽水沖洗，必要時尋求醫(yī)生的幫助。
5. 對于甲醛浸泡的組織樣本，每次可以取5-10mg的組織樣本，用雙蒸水洗滌離心收集后后，直接從步驟4開始操作。
6. 提取的蛋白沉淀如果用于ELISA、RIA等免疫實驗，可能需要行抗原修復(fù)程序，但是如果用Western Blot或Dot blot實驗，一般情況下沒有必要。
7. 本試劑盒只能夠用于體外實驗，不能夠用于臨床、治療和動物體內(nèi)實驗等，由此產(chǎn)生的后果概不承擔(dān)責(zé)任。
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