北京百奧萊博供應的M-MuLV反轉錄酶用于生化實驗研究等領域，我公司的M-MuLV反轉錄酶品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)(逆轉錄酶)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)(逆轉錄酶)
英文名稱：M-MuLV Reverse Transcriptase(RNase H minus)
產品貨號：YT393
產品規格：2000U

本品是一種經過改造和優化的M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)。和普通的M-MuLV反轉錄酶相比，M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)也是一種依賴于RNA或DNA模板的DNA聚合酶，可以以RNA或DNA為模板在引物存在的情況下完成互補DNA鏈的合成；但缺失了Ribonuclease H(RNase H)酶活性，不能夠選擇性剪切RNA和DNA雜合雙鏈中的RNA。M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)是zuì常用的反轉錄酶之一。

特點：M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)可以合成長達13kb的cDNA，而普通的M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)僅能合成長達9kb的cDNA；M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)的zuì適反應溫度為42-45℃并且在55℃時仍然有很高活性，可以避免普通的M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)在37℃反應時的一些不足。

用途：M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)常用于在獲得總RNA或mRNA后cDNA條鏈的合成。M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)合成的cDNA條鏈后續可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二條鏈的合成等。M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)也可以用于DNA探針的標記，通過引物延伸(primer extention)來分析RNA，以及用于基因芯片熒光探針的標記。

來源：本M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)由大腸桿菌表達，表達的基因為經過突變優化的編碼Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase的pol基因片段。

活性定義：One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTMP into a polynucleotide fraction in 10 min at 37℃. Enzyme activity is assayed in 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 6 mM MgCl2, 10 mM DTT, 40 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。

純度：不含DNA內切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以滿足常規反轉錄合成cDNA條鏈等的需要。

酶儲存溶液：50 mM Tris, pH 8.3, 100mM NaCl, 1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。

Reaction Buffer(5X)：250 mM Tris, pH 8.3 at 25℃, 250 mM KCl, 20 mM MgCl2, 50 mM DTT。

失活或抑制：70℃孵育10分鐘可以導致M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)失活；EDTA、EGTA等螯合劑、無機磷酸鹽或焦磷酸鹽以及聚氨(polyamine)對M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)有抑制作用。

本產品中M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)的濃度為200U/μl，用于體積為20微升的反轉錄體系時足夠進行10次反轉錄反應。

儲存條件：-20℃。

根據您的關注的M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)(逆轉錄酶)，您可能還對以下產品有需求：



名稱：Therminator II DNA聚合酶
貨號：BTN131196
規格：100U
Therminator II DNA聚合酶是9°Nm DNA聚合酶中的一種，但有較強的修飾底物摻入能力，如dNTP、rNTP和acyNTP。Therminator II DNA聚合酶是Therminator DNA聚合酶的衍生物，前者比后者多了一個氨基酸突變。這種改變提高了rNTP和3′功能基團經修飾核苷酸的摻入效率。

產品特點：
1．提高了修飾核苷酸特別是rNTP的摻入能力；
2．部分核糖核酸置換法測定DNA序列；
3．ddNTP或acyNTP的鏈終止法測序；
4．ddNTP或acyNTP鏈終止法測序用于SNP分析。

產品組成：

成份	規格
Therminator II DNA聚合酶(2000U/mL)	50μL
10×Buffer	1.5mL
使用手冊	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

活性定義：1單位指75℃條件下，30分鐘內使10nmol的dNTP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

名稱：RNase H
貨號：YT511
規格：100U
本酶是一種核糖核酸內切酶，可以特異性地水解DNA-RNA雜合鏈中的RNA。RNase H不能水解單鏈或雙鏈DNA或RNA中的磷酸二酯鍵，即不能消化單鏈或雙鏈DNA或RNA。

特點：特異性消化DNA-RNA雜合鏈中的RNA，常用于cDNA第二鏈的合成。
用途：DNA-RNA雜合鏈中去除RNA，例如cDNA第二條鏈合成前去除mRNA；通過互補的DNA序列實現對RNA的定點剪切；除去雜交到poly(dT)上的mRNA中的poly(A)；體外多腺苷酸化反應(polyadenylation reaction)產物研究。
來源：E.coli MRE-600細胞。
分子量：約18.4kDa(單體)。
活性定義：37℃20分鐘內，能夠催化1nmol雜合雙鏈中的RNA形成酸可溶性核糖核苷酸形式所需的酶量定義為1個活性單位。
活性檢測條件：20mM Tris-HCl(pH7.8)，40mM KCl，8mM MgCl2，1mM DTT，24μM[3H]-poly(A).poly(dT)，0.03mg/ml BSA ，4%(v/v)glycerol。
純度：不含DNA內切酶和外切酶，不含其它核糖核酸酶。
酶儲存溶液：25mM HEPES-KOH(pH8.0)，50mM KCl，1mM DTT，1mM EDTA，0.1mg/ml BSA，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：200mM Tris-HCl(pH7.8)，400mM KCl，80mM MgCl2，10mM DTT。
失活或抑制：65℃加熱10分鐘可使RNase H失活。金屬離子螯合劑和巰基封閉劑均能抑制RNase H活性。
儲存條件：-20℃。

使用說明：

1. DNA-RNA雜合鏈中去除RNA：
a. 用反轉錄酶，例如RT M-MuLV反轉錄酶或RT M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)合成cDNA條鏈，70℃孵育10分鐘終止反應。
b. 在冰浴上向已經合成條鏈的20μl反應體系中依次加入如下試劑：
Reaction Buffer (10X)————2μl
無核酸酶去離子水——————217.8μl
RNase H (5U/μl)——————20.2μl
c. 按上述體系配好之后，輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用 Vortex在zuì低速度輕輕混勻)，隨后離心沉淀液體。
d. 37℃孵育1小時。
e. 加入2.5μl 0.5M EDTA(pH8.0)混勻，以終止反應。
f. 后續可以使用酚lǜ仿抽提、乙醇沉淀等方法純化合成的雙鏈cDNA，也可以使用適當的DNA純化試劑盒進行純化。DNA純化試劑盒(YT009)可以向百奧萊博訂購。
說明：其他情況DNA-RNA雜合鏈中去除RNA的條件可以參考上述條件進行。RNase H反應的pH范圍約在7.5-8.3均可。

2. 雜合鏈中RNA的去除和cDNA第二鏈的合成：
a. 用反轉錄酶，例如RT M-MuLV反轉錄酶(YT392)、RT M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)(YT393)或cDNA 鏈合成試劑盒(RNase H-)(YT395)合成cDNA條鏈，70℃孵育10分鐘終止反應。
b. 在冰浴上向已經合成條鏈的20μl反應體系中依次加入如下試劑：
Reaction Buffer (10X) for DNA Polymerase I————8μl
無核酸酶去離子水—————————————————68.8μl
RNase H (5U/μl)—————————————————0.2μl
DNA Polymerase I, E.coli—————————————3μl (30U)
c. 按上述體系配好之后，輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用 Vortex在zuì低速度輕輕混勻)，隨后離心沉淀液體。
d. 15℃孵育2小時。(注意：反應溫度不能超過15℃)
e. 加入5μl 0.5M EDTA(pH 8.0)混勻，以終止反應。
f. 后續可以使用酚lǜ仿抽提、乙醇沉淀等方法純化合成的雙鏈cDNA，也可以使用適當的DNA純化試劑盒進行純化。DNA純化試劑盒(YT009)可以向百奧萊博訂購。
注：Reaction Buffer (10X) for DNA Polymerase I：500mM Tris-HCl(pH 7.5 at 25℃)，100mM MgCl2，10mM DTT。

3. 其他用途請參考上述用途或相關文獻資料進行。

關注M-MuLV反轉錄酶(RNase H-)(逆轉錄酶)，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產品：

貨號	名稱	規格
BTN3160	RNase A溶液(10mg/mL)	1.5mL
YT403	T4 DNA聚合酶	50U
YT406	Klenow片段	100U
YT510	Klenow片段(無外切酶活性)	100U
WE0225	RNase A溶液(100mg/ml)	1ml
SV0005	Acc65I限制性內切酶	10KU|2KU|1KU
SV0038	AluI限制性內切酶	5KU|1KU|500U

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