WE0141 快速實時熒光定量PCR預混體系
- 產品/服務：WE0141 快速實時熒光定量PCR預混體系
- 型 號：WE0141
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-05
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：993
產品簡介
快速實時熒光定量PCR預混體系的品牌是百奧萊博，是優質的核酸擴增(PCR)產品，本制品用于科研試驗，我公司專注于核酸擴增(PCR)產品的研發、生產和供應，為您提供的快速實時熒光定量PCR預混體系質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示：包括快速實時熒光定量PCR預混體系在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：快速實時熒光定量PCR預混體系
英文名稱：BaFaSYBR Mixture
產品貨號：WE0141
產品規格：5ml
本品是專用于染料法(SYBR GreenⅠ)實時熒光定量PCR的預混體系，濃度為2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I熒光染料和Mg2+，操作簡單方便。主要用于基因組DNA靶序列和RNA反轉錄后的cDNA靶序列檢測。本品所含熒光染料SYBR Green I可以與所有的雙鏈DNA相結合，使該產品可用于不同靶序列的檢測而不需合成特異性標記探針。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase能有效減少在常溫條件下由引物和模板非特異性結合或引物二聚體而產生的非特異性擴增，酶的激活僅需在95℃孵育20s。整個PCR反應過程比普通反應可節省約40分鐘，大大縮短了PCR的反應時間。獨特的PCR緩沖體系與熱啟動酶的組合，有效抑制了非特異產物的產生，并顯著提高PCR的擴增效率。該產品應用范圍廣，適用于普通和快速定量PCR程序，可適用于無需ROX校正的所有熒光定量PCR儀。
ROX染料用于校正定量PCR儀孔與孔之間產生的熒光信號誤差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 擴增儀。不同儀器的激發光學系統有所不同，因此ROX染料的濃度必須與相應的熒光定量PCR儀相匹配。
不需要ROX校正的儀器(WE0141)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的儀器(WE0142)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的儀器(WE0143)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。
產品組成：
| 組份 | WE0141-5ml | WE0142-5ml | WE0143-5ml |
| 2×BaFaSYBR Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事項：
1、使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經短暫離心后使用。
2、本產品中含有熒光染料SYBR Green I，保存本產品或配制PCR反應液時應避免強光照射。
3、避免反復凍融本品，反復凍融可能使產品性能下降。本產品長期保存可置于-20℃，避光。如果在短期內需要頻繁使用，可在2～8℃保存。
4、本品不能用于探針法熒光定量PCR。
使用方法：
以下舉例為常規PCR反應體系和反應條件，實際操作中應根據模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的改進和優化。
1、PCR反應體系：
| 試劑 | 50μl反應體系 | 終濃度 |
| 2×BaFaSYBR Mixture | 25μl | 1× |
| Forward Primer，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可選) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意：
1)通常引物濃度以0.2μM可以得到較好結果，可以在0.1-1.0μM作為設定范圍的參考。擴增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發生非特異性反應時，可降低引物濃度，由此優化反應體系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因組DNA或1-10ng cDNA為參照，因不同物種的模板中含有的目的基因拷貝數不同，可對模板進行梯度稀釋，以確定zuì佳的模板使用量。
3)不同儀器的激發光學系統有所不同，根據使用熒光定量的儀器選擇加入50×Low ROX or 50×High ROX.
2、PCR反應條件：
| 步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
| 預變性 | 95℃ | 20 s | |
| 變性 | 95℃ | 3 s | 35-40個循環 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 s | |
| 融解曲線分析 | 95℃ | 15 s | |
| 60℃ | 1 min | ||
| 95℃ | 15 s | ||
| 60℃ | 15 s |
注意：
1)本產品所采用的酶須在預變性95℃、20s條件下實現酶的活化。在此條件下，大多數模板可良好的進行解鏈。對GC含量高、二級結構復雜的模板，可將預變性時間延長至1分鐘，以使起始模板充分解鏈。若高溫處理時間過長，會對酶的活性造成影響。可根據模板情況確定zuì佳的預變性時間。
2)建議采用兩步法PCR反應程序，退火溫度請以60-64℃作為設定范圍的參考，發生非特異性反應時，可提高退火溫度。若因使用Tm值較低的引物等原因，得不到良好的實驗結果時，可嘗試進行三步法PCR擴增，退火溫度請以 56℃-64℃的范圍作為設定參考。
3)融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設定，本程序是以ABI 7500熒光定量PCR儀為參照設定。
儲存條件：-20℃，避免反復凍融
根據您的關注的快速實時熒光定量PCR預混體系，您可能還對以下產品有需求：
名稱：PCR抑制物清除劑
貨號：BTN60804
規格：1mL
用血液、土壤、植物、中藥材等樣品中提取的DNA 經常含有會抑制PCR的產物。本產品專門用于解除這些PCR 抑制劑的抑制作用，使DNA 能夠用于PCR擴增。
產品特點：
1. 使用簡單，直接加入PCR反應體系中使用。
2.適用范圍廣，可以用于解除血液、土壤、植物、中藥材等DNA樣品中的PCR 抑制劑。
低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：將本產品按1：10的比例加入到PCR反應體系中即可進行PCR，如果PCR反應體系為50μL，則需要加本產品5μL。
名稱：PCR級高GC的DNA清除劑
貨號：BTN61203
規格：1.5mL
本產品是我司開發的專門用于富含GC的DNA模板擴增的試劑。
產品特點：
1.，使用效果普遍好于常規的添加DMSO和甜菜堿的方法。
2.可以處理GC含量高達80%的DNA模板。
3. 操作簡單，將本產品用于溶解DNA沉淀即可使用。
儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。
使用方法：
將乙醇沉淀的高GC DNA直接溶解在適量的本產品中，充分吹打均勻，然后直接將DNA加入PCR反應體系中進行PCR反應。加入的DNA溶液zuì好不要超過PCR終體積的1/10。剩余的DNA可以長期保存。
名稱：dNTP混合溶液(2.5mM)
貨號：YT390
規格：1ml
本dNTP Mixture為dATP、dCTP、dGTP和dTTP的混合溶液，每種的濃度均為2.5mM，適合用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA或普通DNA合成、引物延伸反應、DNA測序、DNA標記等各種常規分子生物學反應。
本dNTP溶液用超純水配制，并用高純度NaOH溶液調節pH值至7.0，濃度為2.5mM each，即dATP、dCTP、dGTP和dTTP的濃度均為2.5mmol/L。
本dNTP溶液不含DNase、RNase、phosphatase和蛋白酶。
本dNTP溶液經測試，可以直接用于PCR等各種常規分子生物學反應。
儲存條件：-20℃。
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