YT467 C端mCherry標簽融合蛋白質
- 產品/服務：YT467 C端mCherry標簽融合蛋白質
- 型 號：YT467
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-05
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1062
產品簡介
C端mCherry標簽融合蛋白質是高品質的克隆與表達產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于科研試驗，本產品質量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多C端mCherry標簽融合蛋白質等克隆與表達產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括C端mCherry標簽融合蛋白質粒(紅色熒光蛋白)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：C端mCherry標簽融合蛋白質粒(紅色熒光蛋白)
英文名稱：C-mCherry plasmid（with CMV promoter）
產品貨號：YT467
產品規格：1μg
本質粒是哺乳動物細胞表達質粒，用于表達C端含mCherry (DsRed的突變體，一種非常明亮的紅色熒光蛋白)標簽的融合蛋白。該質粒含有CMV啟動子，可以啟動目的蛋白在細胞中的表達。在多克隆位點的后面有一個mCherry的完整編碼序列，因此在多克隆位點根據閱讀框插入目的基因就可以表達C端含有mCherry標簽的融合蛋白。利用mCherry的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達水平和細胞內定位，也可以利用mCherry抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。mCherry與GFP沒有序列同源性，不能使用GFP抗體檢測mCherry。該質粒為卡那霉素抗性。轉染細胞后，可以使用G418篩選穩定表達目的蛋白的細胞株。
本質粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
|
Multiple clo | 651-736 |
| mCherry | 741-1451 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1501-1522 |
| SV40 polyAsignal | 1534-1917 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2055-2361 |
| bla promoter | 2386-2510 |
| SV40 promoter | 2530-2868 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2903-3694 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3695-4153 |
| pUC origin | 4282-4949 |
本質粒(5001bp)的圖譜如下：
使用說明：
1. 次使用時請先取少量本質粒轉化大腸桿菌，進行質粒小量、中量或大量抽提后再用于后續用途。抽提獲得的質粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。
2. 本質粒在其多克隆位點適當酶切后可以插入待表達的目的基因，構建的質粒可以用常規方法轉染細胞。
儲存條件：-20℃。
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儲存條件：低溫運輸，4℃保存，有效期兩年。
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貨號：BTN130204
規格：1mL
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儲存條件：低溫運輸、-20℃避光保存、有效期一年。
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產品特點：
1. 使用pUC19質粒檢測，轉化效率可達107，-80℃保存幾個月轉化效率不發生改變。
2. DB3.1感受態細胞具有鏈霉素抗性。
3. DB3.1菌株基因型：F- gyrA 462endA1 Δ(sr1-recA)mcrB mrr hsdS20(rB-,mB-)supE44Ara-14 galK2 lac Y1 proA2 rpsL20(SmR)xy1-5 λ- leu mtl1
4. 本產品質量穩定，使用方便，質優價廉。
儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。
自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養基等
使用方法：
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl，可以根據實際情況分裝使用。
以下實驗以100μL感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含有相應抗生素的LB 固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
注意事項：
1、涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少，可通過離心(4,000rpm ，2分鐘)后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。
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