QN2777 變性蛋白電泳預(yù)制膠
- 產(chǎn)品/服務(wù)：QN2777 變性蛋白電泳預(yù)制膠
- 型 號：QN2777
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-05
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：925
產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應(yīng)的變性蛋白電泳預(yù)制膠用于科研試驗(yàn)，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價位合理，需要變性蛋白電泳預(yù)制膠等蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括變性蛋白電泳預(yù)制膠(10%,15孔)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：變性蛋白電泳預(yù)制膠(10%,15孔)
英文名稱：SDS-PAGE Gel 10%, 15 wells
產(chǎn)品貨號：QN2777
產(chǎn)品規(guī)格：10塊/盒
本預(yù)制膠是我公司開發(fā)的高性能低成本SDS-PAGE預(yù)制凝膠。預(yù)制膠將凝膠事先配制好，使用者拿來即可上樣進(jìn)行電泳，減去了用戶自配凝膠的麻煩，節(jié)約了大量的時間。本預(yù)制膠默認(rèn)送Running buffer，預(yù)制膠一定要用我們贈送的running buffer作為電泳緩沖液，其他的緩沖液不匹配。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
·特制凝膠和緩沖液配方，分辨率高，條帶清晰，電泳效果佳。
·保存期長，4℃儲存達(dá)到18個月膠夾打開為輕松，無需起撬工具。
·兼容目前市場各種電泳槽,如BIORAD，六一，天能和君意東方等。
·可用于SDS變性電泳。
·10%,12%,15%及4-15%梯度等多種不同濃度供選擇，1.5mm膠厚度。
·電泳時間短，在150V電壓下，電泳40～50分鐘即可完成。
·出售時附送足量的電泳緩沖液。
·玻璃電泳板蛋白吸附率低，電泳效果更好。
產(chǎn)品參數(shù)：
膠板尺寸：9.8×8.4×0.41cm
凝膠尺寸：8.1×7.4×0.15cm
濃度：10%
分離范圍：160Da～20KDa
孔數(shù)：15wells
上樣量：60μl
應(yīng)用：Western blot
保存：4℃，有效期18個月
根據(jù)您的關(guān)注的變性蛋白電泳預(yù)制膠(10%,15孔)，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：
名稱：辛甲基β葡糖苷
貨號：BTN131044
規(guī)格：1g
本產(chǎn)品是一種廣泛用于溶解膜蛋白的非離子型去垢劑。低分子量，可通過透析去除。
儲存條件：常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。
名稱：一站式SDS-PAGE蛋白電泳套裝
貨號：BTN80810
規(guī)格：30次
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此我們公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．一站式，即開即用，用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2．安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到zuì低。
3．靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4．使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時識別加樣孔。
5．電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品組成：
| 成分 | 規(guī)格 |
| 丙烯酰胺干粉 | 60g |
| 甲叉雙丙烯酰胺干粉 | 3g |
| 分離膠緩沖液，4× | 200ml |
| 濃縮膠緩沖液，4×(含染料) | 100ml |
| TEMED | 1.5ml |
| 過硫酸銨(干粉) | 1g |
| SDS-PAGE上樣液，5× | 1套(1mL) |
| SDS-PAGE電泳液，1×(干粉) | 1套(20L) |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運(yùn)輸和保存，但TEMED和5×SDS-PAGE上樣液需低溫運(yùn)輸，分別在4℃和-20℃有效期一年。
自備試劑：去離子水。
使用方法：
1．次使用本產(chǎn)品時需先配制30%丙烯酰胺溶液:在本產(chǎn)品提供的裝有60克丙烯酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自備的去離子水，充分搖晃直到溶解即得200mL 30%丙烯酰胺溶液(用手大約搖10-20分鐘)。
2．次使用本產(chǎn)品時還需配制30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺(19:1)溶液(30% AB溶液，下同): 不同實(shí)驗(yàn)需要加入不同比例的甲叉雙丙烯酰胺。對SDS-PAGE電泳，丙烯酰胺與甲叉雙丙烯酰胺比例一般在19:1左右，因?yàn)榇藭rPAGE膠的孔徑zuì小，分辨率zuì高。制備方法是將3g甲叉雙丙烯酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙烯酰胺溶液中(注意：甲叉雙丙烯酰胺干粉有神經(jīng)毒性，避免吸入粉末)。配好的30%ＡＢ溶液zuì好4℃避光保存并在１月內(nèi)用完。
3．根據(jù)平板的面積和膠的厚度估計需要配制的濃縮膠和分離膠的體積。并根據(jù)要分離的蛋白質(zhì)的大小確定選擇濃縮膠和分離膠的濃度，參考下表：
| 蛋白質(zhì)大小范圍(kD) | zuì佳濃縮膠濃度 | zuì佳分離膠濃度 |
| 15-45 | 4% | 15% |
| 15-60 | 4% | 12.5% |
| 18-75 | 4% | 10% |
| 30-120 | 4% | 7.5% |
| 60-200 | 不需要 | 5% |
注：如果上樣體積少于10μL，可以不需要濃縮膠。
4．配制10%的APS(過硫酸銨)：稱0.1克過APS干粉到1mL去離子水中，搖晃溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
5．配制分離膠：在一個25mL的三角瓶中，先按下表的用量加入水、30%ＡＢ溶液和4×分離膠緩沖液。以下是配制10mL膠的用量，更大體積則各成分用量需按比例增加。丙烯酰胺溶液有神經(jīng)毒性，一定要戴手套操作。
| 膠濃度 | 用量(單位：mL) | ||
| 水 | 30%AB溶液 | 4×分離膠配膠液 | |
| 5% | 5.83 | 1.67 | 2.50 |
| 6% | 5.50 | 2.00 | 2.50 |
| 7% | 5.17 | 2.33 | 2.50 |
| 7.5% | 5.00 | 2.50 | 2.50 |
| 8% | 4.83 | 2.67 | 2.50 |
| 9% | 4.50 | 3.00 | 2.50 |
| 10% | 4.17 | 3.33 | 2.50 |
| 11% | 3.83 | 3.67 | 2.50 |
| 12% | 3.50 | 4.00 | 2.50 |
| 13% | 3.17 | 4.33 | 2.50 |
| 14% | 2.83 | 4.67 | 2.50 |
| 15% | 2.50 | 5.00 | 2.50 |
| 16% | 2.17 | 5.33 | 2.50 |
6．配制濃縮膠(一般使用4%的濃度)：在一個25mL的三角瓶中，先按下表的用量加入水、30%A B溶液和4×濃縮膠緩沖液。以下是配制10mL 4%濃縮膠的用量，丙烯酰胺溶液具有神經(jīng)毒性，一定要戴手套操作。
| 膠濃度 | 用量(mL) | ||
| 水 | 30%AB溶液 | 4×濃縮膠緩沖液(含藍(lán)色染料) | |
| 4% | 6.17 | 1.33 | 2.50 |
7．將分離膠和濃縮膠溶液搖晃混勻，抽真空10-15分鐘以去除溶液中的氧氣(氧氣能抑制丙烯酰胺聚合反應(yīng)，不去除將影響丙烯酰胺聚合反應(yīng))。
8．分別加入50μL 10%APS和30-50μL TEMED(這是配制10mL分離膠和濃縮膠的用量，更大體積的膠則用量需按比例增加)，迅速搖勻。
9．先灌分離膠，在膠的液面距離頂部1.5 cm的時候，停止灌膠。
10．由于分離膠比重較大，可以立即在上面灌濃縮膠，但灌注時必須小心，不要破壞分離膠和濃縮膠的液面，在濃縮膠液面達(dá)到頂部時停止灌膠，插入梳子，室溫聚合30-60分鐘。如果不能做到小心灌濃縮膠，則必須待分離膠室溫聚合30-60分鐘后再灌制。
11．拔出梳子，用1×SDS-PAGE電泳液沖洗加樣孔。
12．將凝膠板固定在電泳裝置上，往上槽和下槽加入足夠的1×SDS-PAGE電泳液。本產(chǎn)品提供20升的SDS-PAGE電泳液干粉，將所有干粉溶解在2 L水中即得10×SDS-PAGE電泳液，用時再稀釋成1×工作液。
13．在蛋白質(zhì)樣品中加入5×SDS-PAGE上樣液(4μL樣品中加1μL上樣液)，100℃煮沸3～5分鐘。短暫離心，取上清上樣。
14．先用10 mA的電流電泳(對0.75mm厚×14cm×14cm的膠)直到染料進(jìn)入從濃縮膠進(jìn)入分離膠。
15．將電流增加到15 mA，直到染料進(jìn)入分離膠底部時終止電泳，取出凝膠進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)處理。
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