QN2713 免疫組化SP法檢測試劑盒
- 產品/服務：QN2713 免疫組化SP法檢測試劑盒
- 型 號：QN2713
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-05
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：969
產品簡介
免疫組化SP法檢測試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研目的，本品質量穩定，價位合理，需要免疫組化SP法檢測試劑盒等免疫檢測產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示：包括免疫組化SP法檢測試劑盒(山羊IgG)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：免疫組化SP法檢測試劑盒(山羊IgG)
英文名稱：SP Kit(Goat)
產品貨號：QN2713
產品規格：3ml|6ml|18ml|110ml
本試劑盒適合于一抗為山羊IgG的免疫組化實驗DAB顯色。本試劑盒是專為免疫組化和其他免疫檢測而設計的，用以顯示組織和細胞中抗原分布。鏈霉親和素(StreptAvidin)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質，同親和素一樣，對生物素有高的親和力，親和素是一個堿性蛋白質（PI=10），經改造后可以轉變成中性蛋白質。鏈霉親和素等電點接近中性，對組織和細胞的非特異吸附很低，因此基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。
試劑盒組成：
| 組分 | 3ml | 6ml | 18ml |
| 封閉液（5% BSA） | 3ml | 6ml | 18ml |
| 3% H2O2 | 3ml | 6ml | 18ml |
| 生物素標記兔抗山羊IgG濃縮液 | 30μl | 60μl | 180μl |
| 鏈酶親和素-POD濃縮液 | 30μl | 60μl | 180μl |
| 稀釋液 | 10ml | 20ml | 60ml |
| 20×DAB 顯色液A | 0.3ml | 0.6ml | 1.8ml |
| 20×DAB 顯色液B | 0.3ml | 0.6ml | 1.8ml |
保存：如果長時間不使用，請將所有試劑存放于-20℃，如經常使用，可將封閉液，3% H2O2和20×DAB顯色液 B 存放于2-8℃以方便使用。
操作步驟（以石蠟切片為例）：
1．切片常規脫蠟至水(三次二甲苯，三次乙醇)。
2．3% H2O2 室溫處理 5-10 分鐘以滅活內源性酶。蒸餾水洗3次。
3．可選步聚：
a、熱修復抗原，將切片浸入0.01M檸檬酸鈉緩沖液（PH6.0），電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔 5～10 分鐘后，反復 1～2 次。冷卻后 PBS（pH7.2-7.6）洗滌 1～2 次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃ 10分鐘，PBS（pH7.2-7.4）洗滌 2～3 次。
c、跳過此步，直接進入下一步。
4．滴加封閉液，室溫 20 分鐘。甩去多余液體，免洗。
5．用稀釋液將一抗按一定比例稀釋（稀釋后的一抗 4℃可保存一周），也可另行購買抗體稀釋液。滴加稀釋的一抗 37℃ 孵育 1 小時左右或 20℃ 2 小時左右，也可 4℃過夜。PBS（pH7.2-7.4）洗滌 3次，每次 2 分鐘。（一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強度、背景有直接關系。一般來說，陽性染色強度不夠時，可提高一抗濃度和延長孵育時間；背景過高時，可降低一抗濃度和縮短孵育時間。）
6．根據用量，用稀釋液將 生物素-兔抗山羊 IgG 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10μl 生物素標記兔抗山羊 IgG 濃縮液混勻，此工作液 4℃可保存一周)。滴加 生物素-兔抗山羊 IgG 工作液，20-37℃ 孵育 30 分鐘。PBS（pH7.2-7.4）洗滌 3 次，每次 2 分鐘。
7．根據使用量，用稀釋液將鏈酶親和素-POD 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10μl鏈酶親和素-POD 濃縮液混勻，此工作液 4℃可保存一周)。滴加鏈酶親和素-POD 工作液，20-37℃，30 分鐘。PBS （pH7.2-7.4）洗滌 4 次，每次 5 分鐘。
8．DAB 顯色：根據用量，用 PBS（pH7.2-7.4）配制，按 1ml PBS 加入 50μl 20×DAB 顯色液 A，加入 50μl 20×DAB 顯色液 B 。充分混勻后滴加到切片上。室溫顯色，鏡下控制反應時間，一般在 5-30分鐘之間。蒸餾水洗滌終止反應。
9．蘇木素輕度復染。脫水，透明，封片。顯微鏡觀察。
對于細胞爬片，固定后，PBS 漂洗兩次，再用 0.5% Triton X-100 室溫孵育 20 分鐘，PBS 漂洗兩次，3% H2O2 處理 15 分鐘；PBS 漂洗兩次，接上述第 4 步。 對于冰凍切片，固定后，PBS 漂洗兩次，接上述第二步。
注意事項：
如果染色背景過高，在 SP 反應之后，DAB 顯色之前，用加有 0.01—0.02% TWEEN-20 的 PBST（pH7.2-7.4）洗滌切片 4 次，PBS 洗 2 次，然后 DAB 顯色。
根據您的關注的免疫組化SP法檢測試劑盒(山羊IgG)，您可能還對以下產品有需求：
名稱：Western封閉液(WB封閉液)
貨號：YT067
規格：100ml
本品可以用于Western時轉移了蛋白樣品的PVDF膜或NC膜的封閉。封閉后，可以減小后續的一抗或二抗和膜的非特異性結合，降低背景，增強信噪比。按照每張膜封閉需要5-10毫升封閉液計算，一個包裝的Western封閉液可以封閉10-20張膜。
注意事項：通常在室溫封閉60分鐘即可。如果對于一些背景非常高的抗體，可以4℃封閉過夜。
儲存條件：4℃，有效期一年。
名稱：封閉液(用TBS配置，不含去垢劑)
貨號：YT874
規格：100ml
本品是zuì新一代的快速封閉液，總體效果顯著優于傳統的基于BSA(牛血清白蛋白)、脫脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封閉液及國外同類產品，可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等實驗中的封閉、一抗或二抗的稀釋。本產品配制在TBS中，不含去垢劑。 按照每張膜封閉需要5-10ml封閉液計算，一個包裝的本產品 可以封閉10-20張膜。
本封閉液快速。封閉時間通常僅需5-15分鐘，并且和BSA、脫脂奶粉、酪蛋白等傳統封閉液以及國外同類的快速 封閉液相比，顯示出更強的信噪比(參考下圖)。
本封閉液封閉后背景低。本封閉液不含血清和白蛋白，確保高的信噪比。
本封閉液兼容性好，兼容辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶和生物素標記的二抗。本產品中添加了不影響HRP和AP活性的防腐劑，不會干擾HRP或AP標記二抗的檢測。同時本產品不含生物素，不會干擾基于生物素的檢測。
本封閉液使用靈活。本產品配制在TBS中，可以直接用于相關實驗，但也可以根據實驗需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至終濃度為0.05%-0.1%后用于封閉、一抗或二抗的稀釋。
本產品與BSA及國外同類產品的封閉效果對比參見下圖。在相同樣品和實驗條件下，僅封閉液及封閉時間存在如下圖所示的差異時，我公司的本封閉液封閉后的整體背景明顯低于BSA封閉后的背景，而且目的條帶亮度明顯高于國外同類品牌產品。
每組實驗從左到右依次為：5μl蛋白Marker，2.5μg蛋白量的HeLa細胞裂解液，5μg蛋白量的HeLa細胞裂解液。請注意對于抗體A，本封閉液比BSA和國外同類產品具有更低 的背景，并且和國外同類產品相比信號明顯更強。對于抗體B，本封閉液比BSA具有更低的背景，和國外同類產品相比信號明顯更強。實際實驗結果會因樣品、抗體、實驗條件等的不同而存在差異，圖中數據僅供參考。
注意事項：
1. 本產品推薦僅使用一次，重復使用可能會導致封閉效果下降。但對于一些信噪比很高的一抗，例如一些內參抗體，本封閉液可以重復使用2-3次。回收的封閉液請勿與未使用 過的封閉液混合。
2. 通常本產品用于PVDF膜及NC膜時的封閉時間為5-15分鐘。對于一些背景非常高的抗體，可以嘗試將封閉時間延長為30-60分鐘。此外，如有特殊需要，也 完全可以4℃封閉過夜。
3. 由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實驗體系的，因此對于一些特殊的實驗，可能需要根據具體情況考慮使用其它更合適的封閉液。
4. 取放PVDF膜和NC膜應使用平頭鑷子，并僅輕輕夾取其邊角，操作過程須避免膜表面產生劃痕、折痕或壓痕等痕跡。
5. PVDF膜一經浸潤和活化，需一直保持濕潤，根據Western進行到的具體步驟可放置于western轉膜液或洗滌液等適當溶液中，否則可能會產生難以封閉的異 常背景。
6. 在背景較高的情況下，為進一步提高信噪比，本產品中可以自行添加Tween-20或Triton X-100至終濃度為0.05%-0.1%。
儲存條件：4℃，有效期一年。
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