SY0406 5ml重力層析空柱
- 產品/服務：SY0406 5ml重力層析空柱
- 型 號：SY0406
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-06-02
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：842
產品簡介
5ml重力層析空柱由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研試驗，我公司專注于蛋白質研究產品的研發、生產和供應，為您提供的5ml重力層析空柱質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示：包括5ml重力層析空柱在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：5ml重力層析空柱
英文名稱：Gravity Chromatography Columns
產品貨號：SY0406
產品規格：5×1套
百奧萊博提供的重力層析空柱，適用于多種親和層析介質的裝填，以便于后續相應蛋白的純化。本品為5ml 重力層析空柱，總裝填體積5ml。
儲存條件：室溫
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| BTN120705 | L-谷胱甘肽(還原型) | 5g |
| YT611 | RIPA裂解液(弱) | 100ml |
| YT615 | PMSF(100mM)(苯甲基磺酰fú) | 10ml |
| WE0264 | 植物蛋白提取試劑盒 | 25次|100次 |
| WE0290 | G250蛋白快速染色試劑 | 250ml |
| SNM378 | Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer(還原，2×) | 5ml |
| SNM384 | 考馬斯亮藍G-250 | 5g |
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名稱：細菌膜蛋白質微量提取試劑盒
貨號：BTN100929
規格：50次
本試劑盒是基于超速離心的快速提取細菌膜蛋白的試劑盒。其原理是裂解細胞后，通過超速離心分離出細胞膜和附著的蛋白質。
產品特點：
1.一步式分離細胞膜和膜蛋白，密度梯度離心法簡單快捷。
2. 膜蛋白純度高，能夠去除各種胞漿蛋白的污染，也能去除松散附著在細胞膜上的蛋白，所得膜蛋白主要是整合蛋白。
3. 膜蛋白完整性好，主要是由于實際中有抑制蛋白酶成分。
4. 回收效率高，一般能得到相當于總蛋白量6%的膜蛋白。
5.可用于E.coli，S.typhimurium，K.aerogens，P.aeruginosa，C.crescentus等細菌。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| 溶液A | 125ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 250ml |
| DNase I干粉 | 3.5mg |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：低溫運輸和保存，DNase I 需要低溫保存。有效期一年。
使用方法：
準備：次使用本試劑盒時需要將所有DNase I干粉倒入溶液B中，輕柔顛倒使DNase干粉溶解。未用完的部分需要放-20℃保存，zuì好在一個月內完，否則DNase 將逐漸失去活性。此外，zuì好在實驗前1小時將溶液B冰浴預冷。
用法一：小量制備(主要用于上樣量比較小的SDS-PAGE電泳等實驗)
1．收集20-40mL 過夜培養的細菌飽和培養液(OD420在1.5左右即可)，2500g室溫離心10分鐘后棄上清。
2．加入2mL溶液A，輕柔吹打，將細菌重懸于溶液A中。
3．2500 g室溫離心10分鐘后棄上清。
4．加入0.5mL溶液B(必須已經提前加入了DNase I干粉)，輕柔吹打使細菌重懸。注：如果細菌起始量沒有20-40mL，溶液A的用量可以等比例降低。重懸在溶液A中的細菌可以放-80℃長期保存。
5．用超聲或French Press方法裂解細胞。如果用French Press方法，則需要處理至少兩次，每次的壓力為9.65×10E7(=14000 psi)。注意：不論用哪種裂解方法，都必須在顯微鏡下檢查細菌是否已經裂解，否則還需要重復細菌裂解過程，直到80%以上的細菌都裂解為止。
6．2500g室溫離心8分鐘后小心轉移上清到新的10mL-15mL塑料離心管中(如Beckman Optima 臺式超速離心機離心管)，棄沉淀(未破裂細胞)。
7．在上清(細菌裂解液)中加入5mL預冷的溶液C，輕柔顛倒混勻后冰浴放置30-60分鐘。其間可以輕柔顛倒混勻3-5次。
8．用 Bechman Optima 臺式超速離心機115000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機，但離心力應該一致，否則有可能得不到沉淀。
9．小心移棄上清，在沉淀中加入0.2mL溶液A，充分吹打混勻。
10．用Beckman Optima 臺式超速離心機 115000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機，但離心力應該一致，否則有可能得不到沉淀。
11．小心移棄上清，所得沉淀放-20℃長期保存，也可以直接加入0.1mL自備的，跟后續實驗兼容的緩沖液(如1×SDS-PAGE上樣液中，可從本公司購買)，所得膜蛋白的濃度將在1mg/mL左右。
用法二：大量制備(主要用于上樣量比較大的2D電泳等實驗)
1．收集200-400mL 過夜培養的細菌飽和培養液(OD420在1.5左右即可)，2500 g室溫離心10分鐘后棄上清。
2．加入20mL溶液A，輕柔吹打，將細菌重懸于溶液A中。
3．2500 g室溫離心10分鐘后棄上清。
4．加入5mL溶液B(必須已經提前加入了DNase I干粉)，輕柔吹打使細菌重懸。注：如果細菌起始量沒有200-400mL，溶液A的用量可以等比例降低。重懸在溶液A中的細菌可以放-80℃長期保存。
5．用超聲或French Press方法裂解細胞。如果用French Press方法，則需要處理至少兩次，每次的壓力為9.65×10E7(=14000 psi)。注意：不論用哪種裂解方法，都必須在顯微鏡下檢查細菌是否已經裂解，否則還需要重復細菌裂解過程，直到80%以上的細菌都裂解為止。
6．2500g室溫離心8分鐘后小心轉移上清到干凈的玻璃燒杯中，棄沉淀(未破裂細胞)。
7．在上清(細菌裂解液)中加入50mL預冷的溶液C，輕輕在冰浴中攪拌混勻30-60分鐘。注：可以在大燒杯中裝冰，然后將裝有樣品的小燒杯放入，在放入干凈的攪拌子，以zuì低速度攪拌。
8．用 Beckman Type 55.2 Ti轉頭 115000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機，但離心力應該一致。
9．小心移棄上清，在沉淀中加入2mL溶液A，充分吹打混勻。
10．用Beckman Type 55.2 Ti轉頭 115000g 4℃離心60分鐘。也可以使用其他冷凍超速離心機，但離心力應該一致。
11．小心移棄上清，所得沉淀放-20℃長期保存或溶解在1mL自備的，跟后續實驗兼容的緩沖液(如1×等電點電泳上樣液，可從本公司購買)，所得膜蛋白的濃度在1mg/mL左右。
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