BTN131134 Percoll
- 產品/服務：BTN131134 Percoll
- 型 號：BTN131134
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1026
產品簡介
Percoll由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學研究方面，我公司的Percoll品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括Percoll在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：Percoll
產品貨號：BTN131134
產品規格：250mL
Percoll是一種常用的低粘度的密度梯度介質，由直徑在15-30nm的硅膠顆粒組成，顆粒外包被了聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，為化學惰性，不會影響細胞的活性。
產品特點：
1．Percoll滲透壓很低(<20mosm/kg H2O)，粘度也很小，可形成高達1.3g／ml 密度。
2．采用預先形成的密度梯度時可在低離心力(200～1000g)于數分至數十分鐘內達到滿意的細胞分離結果。
3．離心后能形成1-1.3g/mL的密度梯度，可用于分離各種懸浮的細胞、線粒體、葉綠體和病毒(可小到70S)。
4．由于Percoll擴散常數低，所形成的梯度十分穩定。此外，Percoll不穿透生物膜，對細胞害，因此廣泛用于分離細胞、亞細胞成分、細菌及病毒，還可將受損細胞及其碎片與完好的活細胞分離。
5．Percoll溶液高壓滅菌，必須進行不添加鹽或蔗糖。鹽的存在會引起percoll糊化，蔗糖的存在會引起焦糖化。
儲存條件：常溫運輸和保存，有效期五年(未開封狀態)。
使用方法：
1．不同濃度(密度)Percoll溶液的制備：先用9 份Percoll與1份 8.5％ NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓，然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
| Percoll濃度(％) | 70 | 60 | 50 | 40 | 30 | 20 |
| 比重g/ml | 1.090 | 1.077 | 1.067 | 1.056 | 1.043 | 1.031 |
2．不連續密度梯度Percoll層的制備：先將試管壁用牛血清濕潤，除去多余血清，這種預處理可使逐層疊加的Percoll液平穩沿管壁流下，使形成滿意的界面。在制備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置，有時相鄰兩層Percoll 比重相差不大時，可將Percoll液放入注射器中，小針頭斜面緊貼管壁，任其自然慢慢流下。
3．裝樣：樣品體積和細胞濃度根據不同細胞而異，一般加樣體積不宜過大，細胞濃度也不可過高，否則會影響細胞的分離和回收。
4．離心：一般采用離心力為400g，時間20～25min。由于多層Percoll 之間密度差別不大，因此離心機加速、降速時要慢，要平穩。
5．取樣：當所要分離的細胞大部分在兩層的界面時，可逐層去除Percoll液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于Percoll 層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細胞經2次洗滌后可供培養或檢測用。
分離純化細胞舉例
1．富含NK活性大顆粒淋巴細胞(LGL)的純化:按順序由下向上逐層加50％、47.5％、45％、42.5％和40％五種不同密度的Percoll,如用10ml 試管(或塑料管)分離,每層Percoll約1.2～1.5ml，初步從外周血中分離的PBMC細胞1×10８懸于１ml培基中，按要求裝樣、離心和取樣。一般富含NK 殺傷活性的LGL細胞位于42.5％與45％Percoll界面以及上下二層的Percoll液中。
2．純化淋巴母細胞和除去死細胞：分別疊加50％和30％Percoll液。收取經PHA(或其它抗原、有絲分裂原)刺激PBMC,或含有較高比例異型的PBMC(如腎綜合征出血熱患者)，按要求裝樣、離心和取樣。位于管底的淋巴細胞為小淋巴細胞；兩層Percoll之間為淋巴母細胞，純度和回收率在80％以上，位于30％Percoll表面是死細胞。收獲淋巴母細胞可進行表型、結構以及功能的研究。
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