QN1110 4×蛋白上樣緩沖液
- 產品/服務：QN1110 4×蛋白上樣緩沖液
- 型 號：QN1110
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：893
產品簡介
4×蛋白上樣緩沖液的品牌是百奧萊博，是優質的蛋白質研究產品，本制品用于生化實驗研究等領域，本品質量穩定，價位合理，需要4×蛋白上樣緩沖液等蛋白質研究產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示：包括4×蛋白上樣緩沖液(含β-巰基乙醇)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：4×蛋白上樣緩沖液(含β-巰基乙醇)
英文名稱：SDS-PAGE loading buffer,4×(with β-Mercaptoethanol)
產品貨號：QN1110
產品規格：10ml
本產品適用于SDS-PAGE(SDS變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質上樣用。其主要成份為SDS，β-巰基乙醇，溴酚藍，緩沖鹽溶液等。 SDS可與蛋白質結合使蛋白質－SDS復合物上帶有大量的負電荷，這時蛋白質本身的電荷完全被SDS掩蓋，消除了各種蛋白質本身電荷的差異，SDS還可以斷開分子內和分子間的氫鍵，破壞蛋白質分子的二級和三級結構;β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質的四級結構，消除了蛋白結構之間的差異。zuì終無電荷及結構上差異的蛋白(亞單位)，電泳速度只是與其分子量大小有關;溴酚藍用作電泳時的指示劑，可大概指示電泳結束的時間。
使用說明：
1. 請按每10μL蛋白樣品加入10μL上樣緩沖液的比例(2倍稀釋)來使用。如果蛋白濃度過高，可用雙蒸水稀釋樣品。
2. 混勻后，100℃水浴加熱3～5分鐘，使蛋白變性。
3. 冷卻到室溫后，10000～14000rpm離心2-5分鐘，取上清直接上樣電泳即可。
注意事項：
1. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時溴酚藍指示條帶的位置大概在30kd左右;膠濃度12%時，約在20kd左右;膠濃度15%時，大概在10kd。請根據自己目標條帶來判斷結果電泳時間。
2. 本試劑因含β-巰基乙醇，有一定的毒性，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3. 蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍指示劑，PH值受保存溫度影響，在低溫凍存狀態下，溶液可能會呈現深棕色，不影響產品使用。
儲存條件：2～8℃，有效期3個月
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名稱：動植物總蛋白微量提取試劑盒
貨號：BTN90707
規格：50次
本產品用于快速提取動植物總蛋白，用于SDS-PAGE凝膠電泳和Western印跡分析以及蛋白活性測定等。
產品特點：
1. 提取過程十分簡便，勻漿離心即可，整個過程只需要十幾分鐘。
2. 采用獨特的溫和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.適用于各種動植物組織材料，包括新鮮或冰凍的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、Western印跡分析以及蛋白活性測定等下游實驗。
5.一次可以處理100mg左右的樣品，足夠進行幾十次SDS-PAGE mini膠電泳檢測。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| 溶液A | 50ml |
| 5×SDS-PAGE上樣液 | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸，4℃保存，5×SDS-PAGE上樣液短期4℃保存，長期可放-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
使用前，zuì好請在溶液A中加入自備的1M DTT溶液50μL。
一：勻漿法
注意：對致密的實體組織(如肌肉)，zuì好用Polytron 式勻漿機勻漿處理。
1. 稱取動物或植物組織樣品100mg，剪刀剪成黃豆大小，轉移到10-15mL的塑料離心管中。
2. 加入1ml溶液A，在冰上用Polytron 式勻漿機勻漿，直到沒有肉眼可見的組織塊。為了避免產熱，可以分多次勻漿，其間放冰上讓勻漿液冷卻。
3. 將勻漿液全部轉移到1.5mL的塑料離心管中。
4. 4℃ 12000 g離心10分鐘，組織殘渣碎片將形成沉淀。
5. 將上清液轉移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測定蛋白濃度，請使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把樣品稀釋10倍后再測定，否則溶液A中的成分會影響濃度側定)。如果要進行SDS-PAGE電泳，可取部分到離心管中，加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×)，在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。
二：直接研磨法
注意：可以使用玻璃和陶瓷的研缽，也可以使用與微量離心管式的研磨杵(BTN80603)
1. 稱取動物或植物組織樣品100mg，剪刀剪成黃豆大小，轉移到預冷的研缽或離心管中。
2. 加入1ml溶液A，用研磨杵研磨，直到沒有肉眼可見的組織塊。
3. 將勻漿液全部轉移到1.5mL的塑料離心管中。
4. 4℃ 12000g離心10分鐘，組織殘渣碎片將形成沉淀。
5. 將上清液轉移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測定蛋白濃度，請使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把樣品稀釋10倍后再測定，否則溶液A中的成分會影響濃度側定)。如果要進行SDS-PAGE電泳，可取部分到離心管中，加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×)，在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。
三：液氮研磨法
注意：zuì好使用玻璃和陶瓷的研缽
1. 取大約100mg動物或植物組織樣品，轉移到預冷的研缽中。
2. 加入少量液氮，用研磨杵研磨成粉。
3. 加入1ml溶液A溶解，然后將溶液全部轉移到1.5mL的塑料離心管中。
4. 4℃ 12000 g離心10分鐘，組織殘渣碎片將形成沉淀。
5. 將上清液轉移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測定蛋白濃度，請使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把樣品稀釋10倍后再測定，否則溶液A中的成分會影響濃度側定)。如果要進行SDS-PAGE電泳，可取部分到離心管中，加入5× SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×)，在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。
注意事項：
1．如果4℃ 12000g離心10分鐘后得到的上清液中還有可見的沉淀，可以將上清轉移到一個新的離心管中后再4℃ 12000g離心10分鐘，以去除可見的小碎片。
2．植物組織中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代謝產物，如果需要除去植物蛋白樣品中殘存的色素等雜質，可以在zuì后得到的上清液中加入5倍體積的冷丙酮或冷甲醇，混勻后-20℃放置1小時或過夜，然后4℃,12000rpm離心10min，棄上清后室溫風干，然后將樣品溶于自備的后續實驗緩沖液中即可。經過此純化處理后，部分蛋白質可能會發生變性，不能再用于活性檢測。
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