QN1805 頭孢吡肟鹽酸鹽試劑
- 產品/服務：QN1805 頭孢吡肟鹽酸鹽試劑
- 型 號：QN1805
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-31
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：985
產品簡介
頭孢吡肟鹽酸鹽試劑是高品質的抗生素類產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于生化實驗研究等領域，頭孢吡肟鹽酸鹽試劑是我司眾多優質抗生素類之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括頭孢吡肟鹽酸鹽在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：頭孢吡肟鹽酸鹽
英文名稱：Cefepime hydrochloride
產品貨號：QN1805
產品規格：500mg
CAS：123171-59-5
分子式：C19H24N6O5S2·2HCl·H2O
分子量：571.5
熔點：150℃(dec.)
儲存條件：2～8℃
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規格：100mg
本品是真核表達篩選用抗生素，可以用于篩選表達特定抗性基因的穩定細胞株。篩選哺乳動物細胞，推薦起始篩選濃度為400微克/毫升;篩選植物細胞，推薦起始篩選濃度為10微克/毫升;篩選酵母，推薦起始濃度為500微克/毫升。根據起始濃度的效果可以再適當升高或降低G-418的使用濃度。
CAS：108321-42-2
分子式：C20H40N4O10·2H2SO4
分子量：692.71
儲存條件：2～8℃
性狀：白色粉末。
溶解性：可溶于水、甲醇、緩沖液和培養基。溶解后，0.22μm過濾除菌，分成小包裝，4℃可保存12個月，-20℃保存時間更長。zuì常用的儲存液使用100mMHEPES(pH7.3)配制，濃度為50mg/ml。使用HEPES配制的好處是加入儲存液不會改變培養體系的pH值。
名稱：嘌呤霉素
貨號：QN0078
規格：25mg|100mg
本品是蛋白質合成抑制劑。抑制細菌、藻類原生物和哺乳動物細胞生長。
CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
儲存條件：-20℃
純度：≥98%(TLC)
性狀：白色或白中帶有黃色的粉末
別名：二鹽酸嘌呤霉素;嘌呤霉素鹽酸鹽
溶解性：溶于水，參考濃度50mg/ml。
嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger)發酵代謝產生的一種氨基糖苷類抗生素，通過抑制蛋白質合成而殺死革蘭氏陽性菌，各種動物和昆蟲細胞。某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。作用機制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的類似物，能夠與核糖體的A位點結合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素同A位點結合后，不會參與隨后的任何反應，從而導致蛋白質合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
嘌呤霉素產生菌Streptomyces alboniger內發現的pac基因編碼嘌呤霉素N-乙酰轉移酶(PAC)，賦予機體對嘌呤霉素產生抗性。這一特性如今普遍應用于篩選特定攜帶pac基因質粒的哺乳動物穩定轉染細胞株。
嘌呤霉素在細胞穩轉株篩選中的普遍應用與慢病毒載體的特性有關，現在商業化的慢病毒載體多數都攜帶pac基因。在某些特定情況下，嘌呤霉素亦可以用來篩選轉化攜帶pac基因質粒的大腸桿菌菌株。
使用方法：
1.建議使用濃度
哺乳動物細胞：1-10 μg/mL，zuì佳濃度需要殺滅曲線來確定;
大腸桿菌：LB瓊脂培養基篩選穩定轉化pac基因的大腸桿菌，使用濃度為125μg/mL。注：使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩轉株需要的pH值調節，而且受宿主細胞本身的影響。
2.溶解方法
用蒸餾水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，經0.22 μm濾膜過濾除菌后分裝于-20℃凍存;也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的儲存液。
3. 嘌呤霉素殺滅曲線的確定(以shRNA轉染或者慢病毒轉導為例)
嘌呤霉素有效篩選濃度跟細胞類型、生長狀態、細胞密度、細胞代謝情況及細胞所處細胞周期位置等有關。為了篩選到穩定表達的shRNA細胞株，確定殺死未轉染/轉導細胞的zuì低濃度嘌呤霉素至關重要。建議初次做實驗的客戶一定要建立適合自身實驗體系的殺死曲線(kill curve)。
1)Day 1：24孔板內以5~8 x 104 cells/孔的密度鋪板，鋪足夠量的孔以進行后續的梯度實驗。37℃細胞孵育過夜;
2)Day 2：
a)準備篩選培養基：含不同濃度嘌呤霉素的新鮮培養基(如0-15μg/mL，至少5個梯度);
b)往孵育過夜后的細胞內更換新鮮配制的篩選培養基;之后37℃孵育細胞;
3)Day 4：更換新鮮的篩選培養基，并觀察細胞存活率。
4)根據細胞的生長狀態，約2-3天更換新鮮的篩選培養基;
5)每日監測細胞，觀察存活細胞率，從而確定抗生素篩選開始4-6天內有效殺死非轉染或者所有非轉導細胞的藥物zuì低濃度。
4. 哺乳動物穩定轉染細胞株的篩選
等轉染含有pac基因的質粒后，細胞在含有嘌呤霉素的培養基中增殖，以篩選出穩定轉染子。
1)細胞轉染48h后，將細胞(原樣或稀釋)置于含有適當濃度嘌呤霉素的新鮮培養基中培養。
注意：當細胞處于分裂活躍期時，抗生素作用zuì明顯。細胞過于密集，抗生素產生的效力會明顯下降。zuì好進行細胞分盤使其密度不超過25%。
2)每隔2-3天，移除和更換含有嘌呤霉素的培養基。
3)篩選7天后評估細胞形成的病灶。病灶可能需要額外的一周或者更多時間，這依賴于宿主細胞系和轉染篩選效率。注意：每日進行細胞生長狀態的觀察。嘌呤霉素的篩選至少需要48h，有效濃度嘌呤霉素的篩選周期一般在3-10天。
4)轉移和放置5-10個抗性克隆到一個35mm的培養皿中，用選擇培養基繼續培養7天。此次富集培養是為日后的細胞毒性實驗做準備。
注意事項：
1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素為有毒化合物，操作時請小心拿放。
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