北京百奧萊博供應的柱式細菌DNA提取試劑盒用于科研試驗，柱式細菌DNA提取試劑盒是我司眾多優質DNA提取純化之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括柱式細菌DNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：柱式細菌DNA提取試劑盒
英文名稱：Column Bacterial DNA Isolation Kit
產品貨號：BTN60802
產品規格：50次

本產品是在百奧萊博在"百無憂"細菌DNA提取試劑盒 基礎上開發的柱式升級產品，可以用于大多數革氏陽性和陰性細菌基因組DNA的快速提取。

特點：
1. 操作簡單，整個過程不到20分鐘。
2. 產率一般在5-20μg/mL 過液培養的飽和菌液（10^8～10^9個細胞）。
3. OD260/280一般在1.8以上，可直接用于PCR、酶切、雜交等實驗。
4. DNA片段長度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以處理0.1-1.5mL的細菌，也可以使用菌落。
6. 價廉物美，與國外同類產品相比質量相當，但價格。
7. 安全，本試劑盒對人體無害，無腐蝕性和刺激性氣味。

產品組成：

組分	編號	規格
溶菌酶干粉	BTN100406	600mg
溶液A	BTN60802A	15mL
溶液B	BTN60802B	7.5mL
溶液C	BTN60802C	30mL
離心吸附柱	BTN60911	50套
通用洗柱液	BTN60408	50mL
DNA洗脫液2.0	BTN111205	10mL

保存條件：常溫(溶菌酶干粉需要4℃或-20℃保存)，有效期一年。

自備試劑：lǜ仿、自備無菌水

使用方法：
注意：溶液A和溶液B 容易產生沉淀，溶液B 十分粘稠，均需要放置在65℃預熱使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分搖勻。

一、對革氏陰性細菌樣品，不需用溶菌酶
1. 將0.1-1.5mL過夜培養的菌液轉移到1.5mL塑料離心管中， 12,000rpm室溫離心1分鐘沉淀細菌，棄上清。
2. 加入300uL預熱的溶液A 到細菌沉淀中，充分吹打均勻。
3. 再加入150uL預熱的溶液B 到離心管中，顛倒數次混勻。此時溶液中可能有白色絲狀懸浮物產生。由于溶液B 比較粘稠，可以采取稱量方法取用，150μL約等于150-160 mg。也可以將1mL 槍頭剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3-5分鐘。如果室溫放置，DNA 產量會降低10-20%。
5. 加入200μl 自備lǜ仿，震蕩混勻10-30 秒，此時溶液將呈乳白色。
6. 12,000rpm 室溫離心2分鐘。此時上清液將變得透明，中間層有白膜。小心轉移上清液到一個新的1.5mL 塑料離心管中，避免觸及中間層的白膜。
7. 加入1.5 倍體積(約0. 7mL)的溶液C，顛倒混勻后全部轉移到離心吸附柱中，室溫放置至少2分鐘。
8. 12,000rpm 室溫離心1分鐘，DNA 將吸附在離心吸附柱的膜上，倒棄收集管中的穿透液。
9. 將0.5mL 通用洗柱液加入離心柱中，12,000rpm 室溫離心1分鐘，棄穿透液。
10. 重復上步操作一次。
11. 空甩半分鐘去除殘留液體,將離心吸附柱轉移到新的1.5mL 離心管中。
12. 加50-100μl 通用洗脫液，室溫放置3-5分鐘。
13. 12,000rpm 室溫離心1分鐘即得DNA 溶液。
14. 由于本產品使用的離心吸附柱吸附DNA的能力較強，可以重復上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μl 電泳檢測DNA，其余放冰箱備用。

二、對革氏陽性細菌樣品，需用溶菌酶
1. 將0.1-1.5mL 過夜培養的革氏陽性細菌12,000rpm 室溫離心1分鐘后, 重懸于0.6mL 溶菌液中（溶菌液配制:30mL 無菌水+600 mg 溶菌酶，配制后zuì好分裝成小管并放-20℃長期保存，每次只用一小管)，顛倒混勻5-10 次后放37℃保溫至少30分鐘(有的革氏陽性菌種可能需更長時間，需要自己根據不同的細菌摸索)。
2. 12,000rpm 室溫離心10分鐘，小心棄上清。
3. 后續處理接上面的革氏陰性細菌提取步驟中的第2 步。

三、其他注意事項
1. 可以直接使用細菌菌落提取DNA，操作時直接將細菌菌落挑入到溶液A中，后續操作同上。
2. 從單個菌落中提取到的DNA 較少，所以只用30μl 通用洗脫液洗脫。

使用效果：

圖注：用本產品提取1.0mL過夜培養的E.coli Tg1細菌，DNAzuì后溶于100μl TE中，取20μl上樣。M表示全長的DNA,其余均為提取的樣品DNA。

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貨號	名稱	規格
BTN70903	一步法質粒DNA提取試劑盒2.0	50次
BTN60801	柱式腐殖酸清除劑	30次
WE0400	口腔拭子DNA樣本保存管	200μl×20支
SY0002	溶菌酶	5g|10×5g
SY0006	核糖核酸酶A(100mg/ml)	1ml
QN0899	去內毒素質粒大量提取試劑盒	10T
QN0903	質粒大量提取試劑盒	10T

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名稱：白細胞裂解液
貨號：BTN130989
規格：250mL
本品為即用型白細胞裂解溶液，可以用于裂解分離純化好的血液白細胞，用于DNA提取、RNA提取等后續實驗。

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以DNA提取為例)
1. 取新鮮抗凝血5mL，在10mL或15mL的塑料離心管中用紅細胞裂解液裂解紅細胞(紅細胞裂解液有幾種配方，用戶需要根據所選產品的使用手冊進行操作，這里不列出每種的詳細步驟)，也可以直接2500rpm離心5分鐘后取白細胞層到一新的10mL或15mL的塑料離心管中。
2.在所得的白細胞沉淀中或所得白細胞層溶液中加自備的生理鹽水使得白細胞的終體積為2mL。
3. 加1mL的本產品，混勻后55℃ 保溫3小時，其間輕輕振搖數次。
4. 加入3mL自備的Tris飽和酚，輕輕震搖5分鐘，使得水相和酚相充分分開。
5. 3500rpm離心15分鐘，上層水相含DNA，中間白色層為蛋白質，下層為酚相。
6. 將非常粘稠的含DNA的上清液轉移到一干凈的10mL或15mL的塑料離心管中。
7. 再用Tris飽和酚重復上面的抽提步驟，直到離心后中間層沒有白色的蛋白出現為止。
8.在上清液中加入等體積的自備的lǜ仿，輕輕震搖5分鐘，3500rpm離心5分鐘，轉移上清液到一干凈的10mL或15mL的塑料離心管中。此步可以除去殘留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍體積的自備的3 M 乙酸鈉溶液(pH5.2)和2倍體積的無水乙醇，輕柔顛倒混勻，將出現絮狀的DNA沉淀。
10. 用移液槍頭將DNA沉淀挑取出來，轉移到1.5mL的塑料離心管中，用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中殘留的鹽離子。
11.轉移DNA沉淀到一個1.5mL的塑料離心管中，空氣中放置10分鐘左右待乙醇揮發后，加入0.5mL自備的TE緩沖液溶解DNA，4℃放置待用。

名稱：痰液采集器
貨號：BTN130938
規格：1個

名稱：植物DNA提取試劑盒
貨號：BTN3672
規格：50次
本試劑盒是根據經典的方法改良得到的專門用于提取新鮮或冷凍植物組織基因組DNA(包括葉綠體DNA和線粒體DNA)的試劑盒。

產品特點：
1. 操作快速，整個過程在30分鐘內即可完成。
2. 純度高，A260/A280在1.9左右，可直接用于PCR、酶切、雜交等分子生物學實驗。提取得到的DNA大小在30-50Kb 之間。
3.產率高，高于大多數同類產品(尤其是基于離心柱的提取產品)。
4. 安全，本試劑盒對人體，無腐蝕性和刺激性氣味。

試劑盒組成：

成分	規格
溶液A	40ml
溶液B	20ml
RNase A溶液(10mg/mL)	0.75ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸及保存，RNase A溶液4℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易產生沉淀，溶液B比較粘稠，用前均需要放置在65℃預熱使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分搖勻。

1. 65℃預熱溶液A，待其沉淀溶化后，充分混勻，取0.75mL 加入到10-15mL塑料離心管(常用于培養細菌用)中并放置于65℃待用。
2. 稱取植物組織0.1-0.3g左右，剪成微小的碎片，轉移到裝有溶液A的離心管中短暫勻漿。勻漿過程中將產生大量泡沫，屬于正常現象。也可以液氮研磨后將粉末加入到預熱的溶液A中(建議不要在陶器或玻璃研缽中破碎細胞，因為其中的主要成分二氧化硅會非特異地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研缽中研磨)。
3. 將勻漿液(包括植物碎片)全部轉移到新的1.5mL塑料離心管中。注意：勻漿液較為粘稠，可將1mL 槍頭剪去一截后用于轉移勻漿液，不能吸取的植物碎片可倒入。
4.在勻漿液中加入0.5倍體積 65℃預熱的溶液B，顛倒數次混勻。由于溶液B比較粘稠，可以將1mL 槍頭剪去一截再吸取。
5. 加入15μl的RNase A溶液(10mg/mL)。
6. 65℃放置3～5分鐘。如果室溫放置，DNA產量會降低10-20%。
7. 加入200μl自備lǜ仿，震蕩器上充分震蕩混勻30秒。
8. 12000～15000g室溫離心2分鐘，此時兩相交界面將有白色膜狀物，小心轉移上清液到一個新的1.5mL塑料離心管中，避免觸及中間層的白膜。
9. 加入1倍體積(約750μl)的自備的異丙醇到上清液中，蓋緊蓋子后用手上下顛倒30秒混勻。此時一般將有絮狀DNA沉淀出現。
10. 12000～15000g室溫離心3分鐘。此時管底將有微小DNA沉淀，小心棄上清，注意不要丟棄DNA沉淀。
11.在離心管中加1mL 75%乙醇，短暫震蕩，12000～15000g室溫離心3分鐘，棄上清。
12. 重復上述操作一次。
13. 短暫離心，小心吸棄殘留的液體(此步不要省略，否則殘留的液體含乙醇將會影響DNA電泳、酶切和PCR等反應)，室溫晾干。
14. 加入50-100μl自備的TE緩沖液充分溶解DNA沉淀。直接取5-10μl電泳檢測DNA，其余放冰箱備用。

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