WH0016 石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒

產品簡介
石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于生化實驗研究等領域,石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒是我司眾多優質DNA提取純化之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒(特殊脫蠟方式)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒(特殊脫蠟方式)
英文名稱:DNA rapid extraction kit from Paraffin-embedded tissue
產品貨號:WH0016
產品規格:50次
本試劑盒采用特殊的脫蠟方式和裂解條件釋放組織切片中的DNA,從zuì大程度上減少了因福爾馬林交聯對DNA的損傷。此外,采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統進行FFPE DNA提取。整個過程不涉及有機試劑二甲苯,安全可行、簡單快速;提取的基因組完整性好,純度高,質量穩定可靠。使用本試劑盒提取的FFPE DNA可適用于多種下游應用,如PCR和real-time PCR;SNP基因分析和STR基因分析;藥物基因組學研究等。
產品特點:
·方便快捷:整個操作過程在1小時內完成。
·安全可行:不涉及二甲苯等有機試劑,無害。
·經濟:無需蛋白酶K消化,獨特的裂解液和特異的吸附柱提取高純度的DNA。
試劑盒組成:
| 組分 | 50T |
| 裂解液GL | 30ml |
| 緩沖液GP | 3 ml |
| 緩沖液GD | 13 ml |
| 漂洗液PW | 15 ml |
| 洗脫緩沖液TE | 15 ml |
| RNase-Free吸附柱CR2 | 50個 |
| 收集管(2 ml) | 50個 |
保存條件:室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個月,更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產生沉淀,使用前應將試劑盒內的溶液在室溫放置一段時間,必要時可在37℃水浴中預熱10min,以溶解沉淀。
注意事項:(請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項)
1.拿到樣品后要盡快在4-10%的福爾馬林中固定,固定時間以8-24小時為宜,時間過長導致基因組斷裂,影響下游實驗。
2.確保包埋前的樣品徹底脫水,殘留的福爾馬林會抑制PCR檢測酶的作用。
3.本產品適用于醫學、科學實驗研究。
4.本產品所提DNA的完整性依賴于樣本類型、儲存時間以及固定條件。如果甲醛固定時間過長或樣本存放時間過久(>1年)則易導致DNA完整性受損,無法擴出長片段。
5.若裂解液GL、緩沖液GD中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,搖勻后使用。
6.試劑盒中各試劑在使用前應按照說明書要求操作。
7.DNA含量低的石蠟包埋組織樣本推薦使用T我司WH0015石蠟包埋組織DNA提取試劑盒進行提取。
使用方法:
次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在GD和PW中加入無水乙醇!所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1.樣本處理
a.石蠟切片:取石蠟切片(5-10μm厚,1×1cm2大小)5-8張。
b.石蠟塊:手術刀刮取約30mg的組織樣本(盡量去除多余的石蠟)。
注意:如果樣品表面暴露于空氣中,zuì初刮取的2~3片棄掉不用。
c.福爾馬林等固定液中的樣本:取30mg樣本,用手術刀切為數塊,置于1.5 ml離心管中,加入500μl PBS (10mM,pH7.4)渦旋振蕩混勻12000rpm(~13400×g )室溫離心1 min,棄上清,重復3次。
2.將樣本裝于1.5 ml無菌離心管中,加入500μl裂解液GL,再加入50 μl緩沖液GP,劇烈渦旋10 sec。
3.98℃孵育30 min,期間顛倒混勻3次,直至樣品完全溶解。
注意:水浴請用長鑷子操作。
4.12000rpm(~13400×g )室溫離心5 min。
5.使用200 μl槍頭沿管壁小心吸取中間層的水相清液于新的離心管中(上層是石蠟及蛋白混合物,下層為少許雜質沉淀,如果分層不徹底可以延長離心時間,直到上層混合物和水相清液很好的分開)。
6.(可選步驟)如果要去除RNA,可以將樣品中加入2 μl RNase A(100 mg/ml),室溫孵育2 min后,進行下一步操作。
7.加入2倍體積的無水乙醇(例:450 μl水相清液加入900 μl無水乙醇),充分混勻,靜置3min。
8.將上一步所得的混合液加入一個吸附柱CR2中,8000rpm(~6,000×g )室溫離心2 min,倒掉收集管中的廢液,重新將吸附柱放回收集管中。
注意:吸附柱zuì大容量為700 μl,可將剩余液體重復上述步驟上柱。
9.向吸附柱CR2中加入500μl緩沖液GD,8000rpm(~6,000×g )室溫離心1 min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
10.向吸附柱CR2中加入600 μl漂洗液PW 8000rpm(~6,000×g )室溫離心1 min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
11.重復操作步驟10。
12.將吸附柱CR2放回收集管中,12000rpm(~13400×g ),離心2 min,倒掉廢液。將吸附柱開蓋置于室溫放置2-5 min,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
注意:乙醇殘留會抑制后續的酶反應,所以晾干時要確保乙醇揮發干凈。但也不要干燥太長時間,以免難以洗脫DNA。
13.將吸附柱CR2轉入一個干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加65℃預熱的30-100 μl洗脫緩沖液TE或ddH2O洗脫,室溫放置2-5min,12000rpm (~13400×g)離心2 min,將收集有DNA的離心管-20℃保存。
注意:洗脫緩沖液體積不應少于30 μl,體積過小影響回收效率。為增加基因組DNA的得率,可將離心得到的溶液再加入吸附柱CR2中,室溫放置2 min,12000rpm(~13400×g )離心2 min。洗脫液的pH對于洗脫效率有很大影響。若用ddH2O做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5范圍內,pH值低于7.0會降低洗脫效率;且DNA產物應保存在-20℃,以防DNA降解。
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