WE0180 糞便基因組DNA提取試劑盒
- 產品/服務：WE0180 糞便基因組DNA提取試劑盒
- 型 號：WE0180
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-23
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：1145
產品簡介
糞便基因組DNA提取試劑盒是高品質的DNA提取純化產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于生化實驗研究等領域，我公司的糞便基因組DNA提取試劑盒品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括糞便基因組DNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：糞便基因組DNA提取試劑盒
英文名稱：Stool Genomic DNA Extraction Kit
產品貨號：WE0180
產品規格：50次
本試劑盒適用于從糞便樣本中提取總DNA，包括細胞、細菌、寄生蟲以及病毒DNA，也適用于含有高濃度PCR反應抑制劑的樣本。本品可處理多至300 mg的糞便樣本，純化獲得主要為20-30 kb的DNA片段，純化過程中不需苯酚或lǜ仿等有毒溶劑，無需乙醇沉淀，可在一小時內獲得高純度的DNA。本試劑盒采用獨特的緩沖系統使裂解液中的DNA結合到吸附柱上，同時糞便中的蛋白雜質及抑制下游反應的其他有機化合物可流過膜，PCR和酶反應的抑制劑以及殘留的雜質可通過兩步洗滌步驟有效去除，zuì后使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可獲得高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。
試劑盒組成：
| 組份 | 50次 |
| Buffer SW | 60ml |
| Buffer SL | 60ml |
| Buffer GL | 50ml |
| Buffer GW1(濃縮液) | 2×13ml |
| Buffer GW2(濃縮液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
實驗前準備及重要注意事項：
1、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA 片段較小且提取量下降。
2、次使用前應按照試劑瓶標簽的說明預先在Buffer GW1和GW2中加入無水乙醇。
3、使用前請檢查Buffer SL和Buffer GL是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀，請將Buffer SL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
4、如果下游實驗對RNA污染比較敏感，可以在加入Buffer SL后加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)， RNase A本試劑盒并未提供，如需要可單獨向本公司訂購，貨號:WE0225S。
操作步驟：
1、取100-300 mg糞便樣本，置于離心管(自備)中。
2、加入1ml Buffer SW，渦旋振蕩3-5分鐘，使樣本均勻分散于溶液中。12000rpm(～13400×g)離心1分鐘，棄上清。
3、加入1ml Buffer SL，渦旋振蕩3-5分鐘，使樣本均勻分散于溶液中，65℃水浴20分鐘，期間可每隔5分鐘渦旋振蕩15秒。
注意：如需去除RNA，可在上述步驟完成后，加入4μl濃度為100 mg/ml的RNase A溶液(貨號：WE0225S)，震蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。
4、12000rpm離心3分鐘，將上清移至新的離心管(自備)中。
5、向上清液中加等體積Buffer GL，顛倒混勻15-25次，冰上放置5分鐘。12000rpm離心5分鐘。
注意: 此時液體可能為透明或渾濁狀態，均不影響實驗。
6、將步驟5中所得上清加入到已裝入收集管的吸附柱中，若一次不能加完溶液，可分多次轉入。12000rpm(～～13400×g)離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
8、重復步驟7。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
10、12000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘，以徹底晾干。
注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除，乙醇的殘留會影響后續的酶促反應(酶切、PCR 等)。
11、將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中，向吸附柱的中間部位懸空滴加50-100μl Buffer GE或滅菌水，室溫放置2-5分鐘，12000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游實驗對pH值或EDTA敏感，可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調到此范圍)，pH值低于7.0時會降低洗脫效率。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或滅菌水再次洗脫可以增加產量。
4)如果要提高DNA的終濃度，可以將步驟11所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上，重復步驟11；可以增加DNA的終濃度，但可能會減少總產量。如果DNA的量小于1μg，推薦用50μl Buffer GE或滅菌水洗脫。
5)保存在水中的DNA會受到酸性水解作用的影響，如需長期保存，推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。
6)基因組DNA模板中殘余的微量PCR抑制物可能對PCR反應產生不良影響，可將DNA稀釋2-10倍通常即可解決。
儲存條件：室溫(15～30℃)。
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