超級(jí)雜交液(Oligo探針)由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品僅用于生物化學(xué)研究方面，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價(jià)格，深為用戶稱道，了解更多超級(jí)雜交液(Oligo探針)等探針標(biāo)記及檢測(cè)產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢訂購(gòu)。...

特別提示：包括超級(jí)雜交液(Oligo探針)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：超級(jí)雜交液(Oligo探針)
英文名稱：Super hybrid solution(Oligo probe)
產(chǎn)品貨號(hào)：BTN130904
產(chǎn)品規(guī)格：10mL

本產(chǎn)品為即用型Oligo探針專(zhuān)用核酸雜交液。核酸雜交一般是指用一種標(biāo)記的核酸探針與印跡膜上的核酸進(jìn)行雜交，由此檢測(cè)印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子(靶分子)。核酸雜交是分子生物學(xué)的基本技術(shù)之一，應(yīng)用非常廣泛。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 既可以用于DNA Oligo探針，也可以用于RNA Oligo探針。
2. 即開(kāi)即用，使用方便。

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 對(duì) Oligo探針的雜交，Tm=GC 數(shù)量×4℃+AT 數(shù)量×2℃。
2. 對(duì) Oligo探針的雜交，zuì佳雜交溫度一般比Tm低5℃。由于Oligo 較短，更容易受各種因素影響(如錯(cuò)配率、修飾堿基比例等)，所以zuì佳溫度需要適度摸索和優(yōu)化。
3. 確定洗膜溫度: Oligo探針可以室溫洗膜。
4. 預(yù)雜交步驟
預(yù)雜交就是用不含Oligo探針的本產(chǎn)品跟印跡膜進(jìn)行孵育，其目的是用所含的非特異性DNA分子(鮭精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物將印跡膜上會(huì)非特異地吸附Oligo探針?lè)肿拥奈稽c(diǎn)封閉，否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附Oligo探針，造成高背景。
1)將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的6×SSC溶液中，使其充分濕潤(rùn)。
2)將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋zuì好預(yù)先封口，再剪掉一角，留一個(gè)小口)，按每平方厘米印跡膜加0.2mL本產(chǎn)品的比例沿小口加入本產(chǎn)品，然后用塑料封口機(jī)將口封牢。
3)將此塑料袋浸沒(méi)入溫度設(shè)定在zuì佳雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中，保溫1-2小時(shí)，延長(zhǎng)到12-16小時(shí)亦可。注意保溫過(guò)程中塑料袋應(yīng)在不停的搖動(dòng)狀態(tài)中，使本產(chǎn)品與印跡膜充分接觸。
5. 雜交步驟
1)將Oligo探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪刀剪一小口，加入Oligo探針后用熱封機(jī)封口)。Oligo探針的加入量視探針標(biāo)記效率而定，一般要求終濃度不能低于1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷貝基因，Oligo探針的加入量應(yīng)加大，而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段，則Oligo探針的量可減少。如果是放射性O(shè)ligo探針，應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
2)在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫，時(shí)間一般為6-12小時(shí)。
6. 洗膜步驟
注意在下面的所有操作過(guò)程中，一定不要使印跡膜干燥。
此步是將與印跡膜非特異結(jié)合的探針?lè)肿酉慈ザ涣粝绿禺惤Y(jié)合的Oligo探針?lè)肿印Ｓ捎诜翘禺愋噪s交的雜交分子解鏈溫度較低，熱穩(wěn)定性較差，在一定的溫度和較低的離子強(qiáng)度下，即可洗掉。
1)雜交完畢，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含Oligo探針的雜交液。此含Oligo探針的雜交液可以多次使用再倒棄。
2)剪開(kāi)雜交袋，用鑷子取出印跡膜，浸沒(méi)于大量的2×SSC(含0.5 % SDS)溶液中，室溫下振蕩漂洗15分鐘。
3)重復(fù)上步操作一次。
4)將印跡膜轉(zhuǎn)移至0.1×SSC(含0.1% SDS)溶液中，在計(jì)算好的洗膜溫度下振蕩漂洗30分鐘至1小時(shí)。
5)重復(fù)上步操作一次。
6)將印跡膜轉(zhuǎn)移到濾紙上，吸去表面液體后印跡膜即可用于后續(xù)檢測(cè)。

疑難解答：
問(wèn)題一：高背景(有或沒(méi)有雜交信號(hào))
解決方案：將放射性O(shè)ligo探針的比活降低到2×10E6 cpm/mL以下；將非放射性O(shè)ligo探針的終濃度降低到30 ng/mL以下；減少雜交時(shí)間；適當(dāng)提高雜交溫度。
問(wèn)題二：沒(méi)有雜交信號(hào)或雜交信號(hào)非常弱
解決方案：雜交過(guò)程中應(yīng)該連續(xù)振蕩，不應(yīng)該有氣泡，避免印跡膜變干。將放射性O(shè)ligo探針活性提高到>5×10E8 cpm/ng，提高非放射性標(biāo)記Oligo探針的終濃度；適當(dāng)降低雜交溫度。

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名稱：脫脂奶粉
貨號(hào)：BTN130907
規(guī)格：50g
本產(chǎn)品為分子生物學(xué)級(jí)脫脂奶粉，可廣泛用于Southern、Northern和Western印跡雜交實(shí)驗(yàn)的封閉試驗(yàn)。

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存、有效期半年。

名稱：鮭魚(yú)精DNA溶液
貨號(hào)：BTN100604
規(guī)格：1mL
本產(chǎn)品是濃度為10mg/mL的、經(jīng)過(guò)熱變性處理的單鏈鮭魚(yú)精DNA溶液，可以用于Southern、Northern預(yù)雜交，還可以用于酵母化學(xué)轉(zhuǎn)化和電轉(zhuǎn)化。本產(chǎn)品即開(kāi)即用，非常方便。

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸和-20℃保存、有效期一年。

名稱：DNA稀釋液
貨號(hào)：BTN121206
規(guī)格：100mL
本產(chǎn)品為專(zhuān)門(mén)用于稀釋核酸探針、模板等珍貴樣品的稀釋溶液。

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

名稱：細(xì)胞pH指示熒光探針BCECF,AM
貨號(hào)：KFS178
規(guī)格：1mg

名稱：活性氧ROS檢測(cè)熒光探針-DHE,紅300/610
貨號(hào)：KFS377
規(guī)格：5mg
二氫乙啶是過(guò)氧化物的指標(biāo)，在細(xì)胞質(zhì)中呈藍(lán)色熒光，被氧化后，可進(jìn)入細(xì)胞的DNA 中，使細(xì)胞核呈現(xiàn)明亮的紅色熒光。

名稱：過(guò)氧化物和過(guò)氧化酶熒光探針Amplex Red,紅540/590nm
貨號(hào)：KFS378
規(guī)格：500T(≈2.31mg）
Amplex Red 是一種靈敏度高，穩(wěn)定性好的過(guò)氧化氫探針，也是一種過(guò)氧化物酶的熒光底物。在HRP 中，的Amplex Red 與過(guò)氧化氫以1:1 進(jìn)行反應(yīng)，產(chǎn)生具有高熒光的試鹵靈。由于和很多不同的酶反應(yīng)都會(huì)產(chǎn)生過(guò)氧化氫，因此Amplex Red 可以用來(lái)檢測(cè)各種酶的活性。

名稱：iFluor 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)
貨號(hào)：SY0568
規(guī)格：300T
本品為iFluor 555標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽，可發(fā)出橘紅色的熒光，具有的高亮度和光穩(wěn)定性，且染色反應(yīng)特異性強(qiáng)，對(duì)比性高，具有比Actin抗體更好的染色效果，適合用作F-actin的定性和定量檢測(cè)。iFluor 555 鬼筆環(huán)肽染色與用于細(xì)胞分析的其他熒光染色完全兼容，包括熒光蛋白、納米晶體和其他iFluor偶聯(lián)物（包含iFluor偶聯(lián)二抗）。另外，經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性。且本品的結(jié)合沒(méi)有物種差異性，適用性廣泛。本品以1000×儲(chǔ)存液形式（溶于DMSO）提供。

鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是一種來(lái)源于毒蕈類(lèi)鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）的環(huán)狀七肽毒素，以高親和力（Kd= 20 nM）選擇性結(jié)合于絲狀肌動(dòng)蛋白F-actin，而不會(huì)與單體肌動(dòng)蛋白G-actin結(jié)合，通常用來(lái)標(biāo)記組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無(wú)細(xì)胞體系中的F-actin，從而對(duì)F-actin進(jìn)行定性和定量分析。另外，鬼筆環(huán)肽衍生物也以相近的親和力結(jié)合于大小纖維，無(wú)論是動(dòng)植物來(lái)源的肌肉細(xì)胞或非肌肉細(xì)胞，按照每一個(gè)肌動(dòng)蛋白亞基約與一個(gè)鬼筆環(huán)肽分子的計(jì)量比結(jié)合。且非特異性結(jié)合幾乎可忽略，染色區(qū)域和非染色區(qū)域辨識(shí)度非常明顯。因此，鬼筆環(huán)肽衍生物特別適合替代肌動(dòng)蛋白（Actin）抗體進(jìn)行相關(guān)研究。另外鬼筆環(huán)肽衍生物很小，直徑約12-15?，分子量＜2000 Daltons，未標(biāo)記肌動(dòng)蛋白（Actin）的許多生理特性都得以維持，比如，同肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能發(fā)生反應(yīng)；鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質(zhì)；以及甘油抽提的肌纖維標(biāo)記后仍可收縮等。

鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）的結(jié)合阻止絲狀肌動(dòng)蛋白（微絲）的解離，穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu)，從而破壞微絲的聚合-去聚合的動(dòng)態(tài)平衡。此特性使得肌動(dòng)蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度（CC）降至＜1μg/mL，因此，可用作一種聚合促進(jìn)劑。此外，鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。

分子量：～1300
zuì大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：556/574nm
溶解性：溶于DMSO
儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥，有效期一年
結(jié)構(gòu)式


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SY0563	Hoechst 33342 染液(1mg/ml)	1ml|10mg|50ml
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