XH004 血液線粒體提取試劑盒
- 產(chǎn)品/服務(wù)：XH004 血液線粒體提取試劑盒
- 型 號(hào)：XH004
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-05-23
- 有效期至：長(zhǎng)期有效
- 瀏覽次數(shù)：1232
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
血液線粒體提取試劑盒是高品質(zhì)的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)研究產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，我公司專(zhuān)注于亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)研究產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的血液線粒體提取試劑盒質(zhì)量可靠，批間差小，且價(jià)格公道，熱切盼望您選購(gòu)我們的產(chǎn)品。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示：包括血液線粒體提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱：血液線粒體提取試劑盒
英文名稱：Blood Mitocho
產(chǎn)品貨號(hào)：XH004
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T
本試劑盒可用于從血液中分離完整而純化的線粒體。其制備物，可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。但不適用于進(jìn)一步DNA提取。
試劑盒組成：
| 組份 | 50T | 100T |
| 紅細(xì)胞裂解液（10X） | 100mL | 100mL×2 |
| 白細(xì)胞裂解液 | 50mL | 100mL |
| 線粒體清洗液 | 25mL | 50mL |
| 線粒體保存液 | 5mL | 10mL |
保存條件：4℃可保存3個(gè)月，長(zhǎng)期保存可置-20℃。
操作步驟：
1．血液處理：
血液要求：非肝素鈉抗凝血，zuì好使用新鮮血液。對(duì)于陳舊血液，由于凍凝過(guò)程中冰晶已經(jīng)對(duì)細(xì)胞核膜和線粒體膜產(chǎn)生損傷，所以線粒體得率會(huì)大大減少，并且完整性也會(huì)降低。
a．對(duì)于無(wú)核紅細(xì)胞全血（如哺乳動(dòng)物處周血），取血約5ml（適當(dāng)分成幾管），加入3倍體積的紅細(xì)胞裂解液（稀釋后的工作液,下同），混勻，800×g 5min離心收集白細(xì)胞。加入1-2ml紅細(xì)胞裂解液（稀釋后的工作液），吹打重懸白細(xì)胞，合并于一管中，800×g 5～10min離心收集白細(xì)胞。此時(shí)如果白細(xì)胞有可見(jiàn)紅色，可再次用少量(0.5ml)紅細(xì)胞裂解液洗細(xì)一次。
b．對(duì)于有核紅細(xì)胞全血（如禽類(lèi)全血），取約200-300μl全血，800×g 5～10min離心收集全細(xì)胞，用生理鹽水或者PBS清洗兩次，留沉淀去上清。清洗時(shí)請(qǐng)用去尖吸頭吹打。
2．在收集到的細(xì)胞中，加入1.0mL冰預(yù)冷的白細(xì)胞裂解液重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi)，0℃冰浴研磨20~40次；
3．勻漿物轉(zhuǎn)移到離心管，4℃，1000×g離心5min；
4．取上清，加入一新的離心管中，4℃，1000×g再次離心5min（一共兩次離心，完整去核）。
5．取上清，加入一新的離心管中，4℃，12,000×g離心10min。離心后的上清含胞漿成分，可從中提取胞漿蛋白。將上清轉(zhuǎn)移到新離心管，線粒體沉淀在管底；
6．在線粒體沉淀中加入0.5 mL線粒體清洗液重懸線粒體沉淀，4℃，1000×g離心5min(再次去核）；
7．取上清，加入一新的離心管中，4℃，12,000×g離心10min。棄上清，高純度的線粒體沉淀在管底；
8．用50 -100μL線粒體保存液或合適的反應(yīng)緩沖液重懸線粒體沉淀，立即使用或-70℃保存。
注意事項(xiàng)：
為保證獲得完整及盡可能多的線粒體，勻漿條件要示：是全程低溫操作。第二是快速。第三，如有條件可將勻漿后的碎片在顯微鏡下觀察。
一般低溫度心機(jī)都有離心力顯示，如果沒(méi)有，可以用以下公式簡(jiǎn)單的換算。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G為離心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍數(shù)來(lái)表示；[rpm]2即：轉(zhuǎn)速的平方；R為半徑，單位為厘米。
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名稱：動(dòng)物線粒體提取試劑盒
貨號(hào)：HR0233
規(guī)格：50T|100T
線粒體(mitochondria)是真核細(xì)胞中產(chǎn)生能量的重要細(xì)胞器。細(xì)胞中的能源物質(zhì)-脂肪、糖、部分氨基酸在此進(jìn)行zuì終的氧化，并通過(guò)偶聯(lián)磷酸化生成ATP，供給細(xì)胞生理活動(dòng)之需。
對(duì)線粒體結(jié)構(gòu)與功能的研究通常是在離體的線粒體上進(jìn)行的，本試劑盒用簡(jiǎn)便快速的方法即可在40分鐘內(nèi)提取得到線粒體。
本試劑盒可用于各種動(dòng)物細(xì)胞和實(shí)體軟、硬組織樣本的線粒體提取。不能用于冷凍樣品的線粒體提取。
儲(chǔ)存條件：2-8℃保存。
有效期：一年。
注意事項(xiàng)：
●本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
● zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
試劑盒以外自備試劑和儀器：
● 移液器、吸頭 ●離心機(jī)及離心管 ● 渦旋振蕩器 ●冰箱，冰盒
使用方法：
使用注意事項(xiàng)：
● 旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
● 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。
● zuì好使用 Dounce 勻漿器勻漿，如果沒(méi)有Dounce 勻漿器，用普通1ml 玻璃勻漿器勻漿也可。
細(xì)胞線粒體提取：
1．取1-2×107個(gè)細(xì)胞，在4℃，500×g條件下離心2-3分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞；
2．用冷 PBS 洗滌兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
3．加入400μl冷的試劑A，置冰上10分鐘。
4．用 Dounce勻漿器勻漿30-40下，然后在4℃，500×g條件下離心5分鐘。
5．快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管。
6．在 4℃，11000×g以上條件下離心20分鐘。
7.在沉淀中加入400μl冷的試劑B，混勻。
8.在 4℃，11000×g以上條件下離心20分鐘。
9．棄上清，沉淀用線粒體保存液重懸。
10．即得到線粒體樣品，置冰箱備用或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。
組織線粒體提取：
1．取50-100mg新鮮動(dòng)物組織樣本，用PBS洗滌干凈。
2．用剪刀盡可能剪碎，用冷 PBS 洗滌兩次。
3．加入 400μl冷的試劑A，置冰上10分鐘。
4．用 Dounce勻漿器勻漿30-40下，然后在4℃，500×g條件下離心5分鐘。
5．快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管。
6．在 4℃，11000×g以上條件下離心20分鐘。
7.在沉淀中加入400μl冷的試劑B，混勻。
8.在 4℃，11000×g以上條件下離心20分鐘。
9．棄上清，沉淀用線粒體保存液重懸。
10．即得到線粒體樣品，置冰箱備用或直接用于下游實(shí)驗(yàn)。
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