WE0182 水產動物基因組提取試劑盒
- 產品/服務：WE0182 水產動物基因組提取試劑盒
- 型 號：WE0182
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-23
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：972
產品簡介
水產動物基因組提取試劑盒的品牌是百奧萊博，是優質的DNA提取純化產品，本制品用于生化實驗研究等領域，本品質量穩定，價位合理，需要水產動物基因組提取試劑盒等DNA提取純化產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示：包括水產動物基因組提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：水產動物基因組提取試劑盒
英文名稱：Marine Animal DNA Extraction Kit
產品貨號：WE0182
產品規格：50次
本試劑盒適合于從多種水產動物(如魚類、蝦類、貝類等)組織中提取總DNA。純化過程不需苯酚或lǜ仿等有機溶劑，無需乙醇沉淀。本試劑盒采用優化的緩沖體系使裂解液中的DNA特異的結合到硅膠質離心吸附柱上，其他污染物可流過膜，蛋白、PCR和其他酶促反應的抑制劑可通過兩步有效的洗滌步驟被有效去除，zuì后使用低鹽緩沖液或水洗脫，即可獲得高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。
試劑盒組成：
| 組份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(濃縮液) | 13ml |
| Buffer GW2(濃縮液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25mg |
| 蛋白酶K 儲存液 | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自備試劑：無水乙醇。
實驗前準備及重要注意事項：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 儲存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿長時間室溫放置，避免反復凍融，以免影響其活性。
2、樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
3、次使用前應按照試劑瓶標簽說明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。
4、使用前請檢查Buffer GTL和Buffer GL是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀，Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游實驗對RNA污染比較敏感，可以在加入Buffer GTL后加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本試劑盒并未提供，如需要可單獨向本公司訂購，貨號：WE0225S。
不同水產動物組織提取得率：
| 樣本 | 建議孵育時間 | DNA得率 |
| 貝類組織 | 0.5 h | 12-20μg |
| 蝦組織 | 1 h | 8-14μg |
| 魚組織 | 1 h | 15-40μg |
操作步驟：
1、取不超過30 mg組織材料，液氮充分研磨后，放入離心管(自備)中，加入200μl Buffer GTL，渦旋振蕩15秒。
注意：
1)根據提取的組織不同，起始量也有不同，腮的細胞量較大，一般建議提取量不超過20 mg。
2)如需去除RNA，可在上述步驟完成后，加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(貨號：WE0225S)，震蕩混勻，室溫放置5-10分鐘。
2、加入20μl 蛋白酶K ，渦旋混勻，簡短離心，使管壁上的溶液收集到管底。56℃孵育，直至組織完全溶解，短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：不同組織裂解時間不同，通常需0.5-2小時即可完成。對于難裂解組織可以適當延長孵育時間。
3、加入200μl Buffer GL，充分顛倒混勻，70℃孵育10分鐘，短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：加入Buffer GL時可能會產生白色沉淀，一般70℃放置時會消失，不會影響后續實驗。如溶液未變清亮，說明細胞裂解不徹底，可能導致提取DNA量少和提取出的DNA不純。
4、加入200μl無水乙醇，充分顛倒混勻，此時可能出現絮狀沉淀，短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。
5、將步驟4所得到的溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次轉入。12000rpm(～～13400×g)離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
注意：如需進一步提高DNA純度，可重復步驟7。
8、12000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘，以徹底晾干。
注意：這一步目的是將吸附柱中殘余乙醇去除，乙醇殘留會影響后續酶促反應(酶切、PCR等)。
9、將吸附柱置于一個新的離心管中，向吸附柱中間部位懸空加入50-200μl Buffer GE，室溫放置2-5分鐘，12000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游實驗對pH值或EDTA敏感，可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調到此范圍)，pH值低于7.0時洗脫效率不高。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或滅菌水再次洗脫可以增加產量。
4)如果要提高DNA的終濃度，可以將步驟9所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上，重復步驟9；若洗脫體積小于200μl，可以增加DNA的終濃度，但可能會減少總產量。如果DNA的量小于1μg，推薦用50μl Buffer GE或滅菌水洗脫。
5)因為保存在水中的DNA會受到酸性水解作用的影響，如需長期保存，推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。
儲存條件：室溫(15～30℃)。
根據您的關注的水產動物基因組提取試劑盒，水產動物基因組提取試劑盒，WE0182，百奧萊博，，，您可能還對以下產品有需求：
| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| BTN80102 | 柱式糞便DNA提取試劑盒 | 50次 |
| BTN90314 | 柱式尿液DNA提取試劑盒 | 50次 |
| BTN60205 | 柱式質粒DNA提取試劑盒 | 50次 |
| BTN71101 | 一步法大提質粒DNA提取試劑盒 | 5次 |
| WE0174 | 植物基因組DNA提取試劑盒 | 50次|200次 |
| ALH157 | 細胞凋亡DNA Ladder提取試劑盒 | 20次|50次 |
| ALH177 | 唾液DNA收集和保存管 | 2ml×10套 |
關注水產動物基因組提取試劑盒，水產動物基因組提取試劑盒，WE0182，百奧萊博，，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產品：
名稱：菌體內毒素清除劑
貨號：BTN90901
規格：200mL
內毒素是E.coli細胞壁的主要成分，傳統的去除內毒素的方法是將內毒素和DNA一起純化出來，然后再用各種方法去除其中的內毒素，操作繁瑣，DNA 回收率低。本產品可以直接把E.coli 表面的內毒素去除，從根本上避免了內毒素對后續操作(如質粒DNA提取，重組蛋白質提取)的污染。
產品特點：
1. 個在菌體收集階段去除內毒素的產品，從源頭上避免了內毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸，從根本上防止了可能產生的污染。
2. 操作簡單快速，用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細菌表面的內毒素，只需要10分鐘左右時間，不需要復雜儀器設備。
3.，能去除99%以上的內毒素。
4.跟各種質粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質提取等操作兼容，DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA 丟失率可以高達50%)。
5. 不影響DNA和大部分蛋白質的活性，處理過的質粒DNA可用于轉染實驗。
6. 既可小規模使用(在1.5mL離心管內)，也可放量用于大規模無內毒素質粒DNA提取和無內毒素蛋白質純化。
儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。
使用方法：
一：用于菌液小于3mL的樣品
1. 收集1.5-3mL E.coli 飽和菌液，12000rpm離心1分鐘，棄上清，得到細菌沉淀。
2. 加入1mL 本產品溫和混勻后10,000-12000rpm離心1分鐘，棄上清(含內毒素)。
3. 再重復上述操作3-4次，得到的菌體可以直接進入后續的無內毒素質粒DNA提取或無內毒素蛋白質提取程序。
二：用于菌液多于3mL的樣品
整個操作同上，只是在15或50mL塑料離心管中進行，離心速度不能超過離心管的承受力，本產品的用量按比例增加。
疑難解答：
Q:為何用常規的方法很難去除生物樣品中的內毒素?
A:因為內毒素帶電性跟DNA和部分蛋白質相同，所以基于帶電性的分離方法(如硅膠膜吸附，離子交換吸附)不能將它們分開;同時內毒素又是雙性分子(類似于細胞膜的磷脂分子)，能夠形成大小不等的聚合物，跟質粒DNA和蛋白質大小接近，所以基于分子量大小的分離方法(如凝膠排阻過濾和氯化銫超速離心)也不能將其有效分離。
如果您覺得“WE0182 水產動物基因組提取試劑盒”描述資料不夠齊全，請聯系我們獲取詳細資料。(聯系時請告訴我從給覽網看到的，我們將給您最大優惠！)
本頁鏈接：http://www.521uz.com/com_bjbiolab/sell/itemid-8528134.html
已經有972位訪客查看了本頁.
