WE0225 RNase A溶液

產品簡介
北京百奧萊博供應的RNase A溶液用于科研目的,我公司的RNase A溶液品質上佳,經過多年的開發生產,已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括RNase A溶液(100mg/ml)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:RNase A溶液(100mg/ml)
英文名稱:RNase A(100mg/ml)
產品貨號:WE0225
產品規格:1ml
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名稱:Tth DNA聚合酶
貨號:BTN90501
規格:250U
本酶來源于嗜熱菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二價陽離子存在的情況下,具有DNA多聚酶活性。它與Taq酶一樣被廣泛用于PCR反應,但耐熱性比Taq酶高,因此對高GC含量模板的PCR 也有較好的效果。本酶基本上沒有3′→5′外切酶活性及5′→3′外切酶活性,所以也可用于雙脫氧法測序。另外,本酶具有RTase活性,在Mn2+存在的情況下,RTase活性會得到強化。利用該特性,可以用來在同一管中進行逆轉錄反應和PCR反應,即一步法RT PCR。(但是,在Mn2+存在時,RT-PCR的準確性不高)此外,本酶與Taq DNA多聚酶一樣,PCR產物可通過T載體進行TA克隆。
產品特點:
1.RT-PCR反應的特異性增加:在較高的溫度下進行逆轉錄,增加了引物雜交和延伸的特異性。
2.二級結構減少:在較高的溫度下進行逆轉錄,減少了由于RNA二級結構引起的問題。
產品組成:
| 成分 | 規格 |
| Tth DNA聚合酶(5U/μL) | 50μl |
| 10×Tth Buffer | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
以λDNA為模板,以10×Tth Buffer(+MgCl2)作為緩沖液進行體積為50μL的PCR擴增反應為例
1.按下列組份配制PCR反應液。
| 成分 | 終濃度 | 用量 |
| Tth DNA聚合酶(5U/μL) | 1.25U | 0.25μl |
| 10×Tth Buffer(+MgCl2) | 1× | 5μl |
| dNTP Mixture(各2.5mM) | 各0.2mM | 4μl |
| 模板DNA | 50pg~1μg | 詳見下表 |
| 引物1(10μM) | 0.1~1μM | zuì多到1μL |
| 引物2(10μM) | 0.1~1μM | zuì多到1μL |
| 滅菌蒸餾水 | 加到50μL |
推薦50μL PCR反應體系中模板DNA推薦使用量:
| 哺乳動物基因組DNA | 0.5~1μg |
| 酵母基因組DNA | 5~500ng |
| 細菌基因組DNA | 0.5~50ng |
| 質粒DNA | 5~500pg |
| PCR回收片段 | 1~100pg |
2.PCR反應條件
以λDNA為模板,擴增1kbp的DNA片段的PCR反應條件如下:

注:PCR反應條件視模板、引物等的結構條件不同而各異。在實際操作中需根據模板、目的片段的大小、堿基序列和引物的長短等具體情況,設定zuì佳的反應條件(溫度、時間等)。
注意事項:
1.循環測序:該酶為耐熱性酶,可通過與PCR 同樣的溫度條件進行測序反應。由于其高溫穩定性好,對于復雜結構的模板效果較好。
2.引物:用于耐熱性酶測序的引物需比用于非耐酶測序的引物設定更長的時間。采用較短的引物時,可能會出現不能獲得條帶變淡的情況。
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