GL0025 鹽酸四環素溶液試劑
- 產品/服務：GL0025 鹽酸四環素溶液試劑
- 型 號：GL0025
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-09
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：998
產品簡介
鹽酸四環素溶液試劑由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科研試驗，我公司專注于抗生素類產品的研發、生產和供應，為您提供的鹽酸四環素溶液試劑質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示：包括鹽酸四環素溶液(5mg/ml)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：鹽酸四環素溶液(5mg/ml)
英文名稱：Tetracyclin Solution
產品貨號：GL0025
產品規格：10ml
用途：
抗生素，抑制細菌蛋白質合成
儲存條件：-20℃，避光，12個月
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名稱：美滿霉素
貨號：QN0051
規格：250mg|1g|5g
本品抗菌譜、抗菌機理均與四環素相同，其抗菌作用顯著強于金霉素、四環素、土霉素，也比多西霉素、美他環素強。金葡萄對該品不易產生耐藥性。對四環素耐藥的金葡萄、鏈球菌、大腸桿菌對該品可能敏感。
CAS：13614-98-7
分子式：C23H28ClN3O7
分子量：493.94
儲存條件：2～8℃
性狀：黃色結晶性粉末。溶于水，遇光不穩定，味苦。
別名：鹽酸米諾環素;二甲胺四環素鹽酸
名稱：青鏈霉素混合液(100×)
貨號：QN0061
規格：100mL
本品在培養液中推薦的工作濃度為100U/ml ，鏈霉素的工作濃度為0.1mg/ml。即按照100倍稀釋使用即可。
操作說明：
1、從－20℃冰箱里取出青鏈霉素混合液(100×)。
2、室溫放置使其融化。
3、超凈臺內操作，每500毫升培養液里加入5毫升青鏈霉素混合液(100倍稀釋)。
4、混勻后，即可使用。
注意事項：盡量減少反復凍融的次數，使用時避免對母液的污染。
儲存條件：-20℃，有效期一年。
名稱：潮霉素B
貨號：QN0095
規格：1g
本品由吸水鏈霉菌代謝產生的一種氨基糖苷類抗生素，通過干擾70S核糖體易位和誘導對mRNA模板的錯讀而抑制蛋白合成，從而殺死原核(如細菌)、真核(如酵母菌，真菌)和高等哺乳動物真核細胞。本品是無菌的潮霉素B溶液(100mg/ml)，可直接用培養液稀釋使用。
CAS：31282-04-9
分子式：C20H37N3O13
分子量：527.52
儲存條件：2～8℃
性狀：澄清或輕微渾濁黃色溶液
大腸桿菌( Escherichia coli.)來源的潮霉素抗性基因(hyg或hph)，編碼潮霉素B磷酸轉移酶，將潮霉素B轉化成不具有生物活性的磷酸化產物，從而起到解毒作用。針對這一原理，潮霉素B是一種非常有用的選擇性標記，用來篩選和維持培養成功轉染潮霉素抗性基因的原核或者真核細胞。另外，由于作用模式的差異，常與G418，Zeocin? 和Blasticidin S聯合使用進行雙抗性陽性細胞株的選擇。潮霉素B還能用作抗病毒劑，因其選擇性滲透進入因病毒感染增強通透性的細胞，且具有抑制翻譯的功效。還可混合入動物飼料中起到驅蟲功能。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：潮霉素B用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve)，即劑量反應性曲線，來確定zuì佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素zuì低濃度，可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現，至少選擇5個濃度。
1)天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜;注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2)根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
| 終濃度(μg/mL) | 培養基體積(ml) | 5mg/ml潮霉素B加入體積(ml) |
| 50 | 9.9 | 0.1 |
| 100 | 9.8 | 0.2 |
| 250 | 9.5 | 0.5 |
| 500 | 9.0 | 1.0 |
| 750 | 8.5 | 1.5 |
| 1000 | 8.0 | 2.0 |
3)第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4)接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5)按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死大多數細胞的zuì低濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1)轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷效果zuì好。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，zuì好將細胞稀釋至豐度不超過25%。
2)每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3)篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4)挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5)之后更換正常培養基培養即可。
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