BTN70904A 酵母tRNA溶液(粗提)
- 產品/服務：BTN70904A 酵母tRNA溶液(粗提)
- 型 號：BTN70904A
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-05-06
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：934
產品簡介
酵母tRNA溶液(粗提)由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科學研究，我公司的酵母tRNA溶液(粗提)品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括酵母tRNA溶液(粗提)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：酵母tRNA溶液(粗提)
英文名稱：Yeast tRNA Solution
產品貨號：BTN70904A
產品規格：1.5mL
本產品分粗體液和精提液兩種類型，濃度均為5mg/mL。A是酵母tRNA粗提液，用作制備更高純度(如分子生物級)酵母tRNA的原材料。B是精提液，是經過本公司柱式RNAadsorp純化的分子生物學級別的酵母tRNA溶液，不含蛋白質和DNA污染，OD260/OD280在1.9左右，可直接用作微量RNA提取和回收的助沉劑，也可以用作原位雜交、Northern雜交的封堵劑，對于探針為RNA的雜交試驗尤其適用。
儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一：以tRNA粗提液(BTN70904A)為材料，酚法制備tRNA精提液(BTN70904B)
1.在1倍體積的tRNA粗提液中加入一倍體積的自備Tris飽和酚，振蕩混勻后12000～15000g離心3分鐘得上清。
2.在上清中再加入一倍體積的自備Tris飽和酚和0.2倍體積自備的氯fǎng，振蕩混勻后12000～15000g離心3分鐘得上清。
3. 重復此步直到酚相和水相之間沒有白膜出現。一般需要2-4次抽提。
4.在上清中加入0.1倍體積的自備3M NaAc(pH5.2)和2倍體積的自備無水乙醇，振蕩混勻。
5. 12000～15000g離心15分鐘以上，小心移棄上清。
6. 用1mL自備 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇，振蕩混勻后12000～15000g離心5分鐘，小心移棄上清)。
7. 短暫離心數秒，小心移棄殘留液體，所得沉淀即是精提的酵母tRNA，可以溶解在自備的DEPC水中，UV測定其濃度，然后直接用于各種分子生物學實驗。
注意：tRNA比較短，又是單鏈，所以電泳時結合EB等染料的能力很弱，測定其濃度時zuì好不要使用電泳比較法，而要使用分光光度法。
注意：此法得率較高，但缺點是不能去除部分多糖污染，因為多糖也能在醇沉淀時沉淀下來。如果zuì后得到的溶液帶顏色，則需要用本公司柱式RNAadsorp精提，詳細過程見該產品使用說明書。
二：tRNA精提液(BTN70904B)作為核酸助沉劑
1.在核酸(DNA或/和RNA)溶液中，加入適當濃度的鹽離子，鹽離子不同其終濃度也不相同，具體如下：
| 鹽 | 終濃度 |
| NH4OAc(醋酸銨) | 0.5M |
| NaCl(氯化鈉) | 0.25M |
| NaOAc(醋酸鈉) | 0.3M |
2. 加入本產品使其終濃度為20μg/mL，混合均勻。
3. 加入兩倍體積的乙醇，混合均勻。
4. 冰上放置15分鐘。
5. 12000～15000g離心15分鐘以上，小心移棄上清。
6. 用1mL 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇，振蕩混勻后12000～15000g離心5分鐘，小心移棄上清)。
7. 短暫離心數秒，小心移棄殘留液體。
8. 將沉淀溶于適當緩沖液中待用。
注：由于tRNA是多聚核苷酸激酶和末端轉移酶的底物，因此如果回收的DNA或RNA要用于此類反應，就不能使用tRNA作為助沉劑。如果回收的RNA要用于RT-PCR，使用tRNA可能會對反應的特異性產生干擾。
三：tRNA精提液(BTN70904B)作為雜交封堵劑
本產品可以作為原位雜交、Northern雜交和RNA斑點雜交的封堵劑，也可以作為Southern雜交和DNA 斑點雜交的封堵劑，但不適于作為菌斑雜交。其在雜交液或預雜交液中的終濃度為100μg/mL。
如果使用RNA探針，zuì好使用本產品做封堵劑，以保護RNA探針。
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