SY0556 鈣黃綠素,超純級

產品簡介
鈣黃綠素,超純級的品牌是百奧萊博,是優質的探針標記及檢測產品,本制品用于科研試驗,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多鈣黃綠素,超純級等探針標記及檢測產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括鈣黃綠素,超純級在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:鈣黃綠素,超純級
英文名稱:Calcein, AM, Ultrapure Grade
產品貨號:SY0556
產品規格:50μg|2×50μg|20×50μg|1mg
鈣黃綠素Calcein-AM是一種對活細胞進行熒光標記的細胞染色試劑,發綠色熒光(Ex=490 nm,Em=515 nm)。 因其在傳統的Calcein(鈣黃綠素)基礎上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團,增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細胞膜。一旦進入細胞后,Calcein-AM(本身不發熒光)被細胞內的酯酶剪切形成膜非滲透性的性分子Calcein,從而被滯留在細胞內并發出強綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM細胞毒性低,是zuì適合用于活細胞染色的熒光探針,而且不會抑制任何的細胞功能,如增殖和淋巴球的趨化性。
由于死細胞缺乏酯酶,Calcein, AM僅用于對活細胞的細胞生存能力測試和短期標記。作為核染色染料的碘化丙啶不能穿過活細胞的細胞膜,它穿過死細胞膜的無序區域而到達細胞核,并嵌入細胞的DNA雙螺旋從而產生紅色熒光(激發:535 nm,發射:617 nm),因此PI僅對死細胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發,因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。而用545 nm激發,僅可觀察到死細胞。根據以上特點,Calcein, AM和PI經常被結合用來作為活細胞和死細胞的雙重染色。由于不同細胞系的zuì佳染色條件不同,我們建議個別確定 Calcein, AM 和 PI的合適濃度。
本品為粉末形式提供的Calcein-AM,超純級別(≥95%),可與碘化丙啶(PI)(SY0491)聯合使用,用于活細胞和死細胞的同時檢測。或者直接購買我司提供的Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒(SY0501)。
中文名稱:3-O-乙酰胺-2,7-二(羧乙基)-4或5-羧基熒光素,二乙酰甲酯;鈣黃綠素乙酰甲酯;
英文名稱:3,6-Di(O-acetyl)-4,5-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester
CAS:148504-34-1
分子式:C46H46N2O23
分子量:994.86
純度:≥95%(HPLC)
Ex/ Em(nm):490/515
儲存條件:-20℃避光干燥,有效期12個月。
結構式

注意事項
1)對于微量試劑,開封前,請稍微離心一下,以保證粉末落入管底。
2)由于Calcein-AM對濕度非常敏感,本粉末保存的過程中一定要保持干燥。對于配制好的Calcein-AM儲存液需要分裝凍存,且必須緊緊密封蓋子,干燥保存。Calcein-AM工作液必須現配現用。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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名稱:TdT加尾法DNA生物素標記試劑盒
貨號:BTN90605B
規格:5次
本試劑盒是基于TdT末端轉移酶能夠在DNA的3′端添加dNTP尾巴的原理而設計,該反應的示意圖如下:

產品特點:
1.快速,15分鐘即可完成標記反應。
2. 不但可用于單鏈DNA和DNA Oligo標記,還可用于3′突出的雙鏈DNA標記,但后者標記效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和dì高辛標記的核苷酸等)。
4. 提供不帶標記核苷酸、帶生物素標記核苷酸和帶dì高辛標記核苷酸三種選擇。
5. 同時提供非標記的dATP,用戶可以用其調節加尾長短和標記核苷酸摻入比例。
6. 標記的探針可用于電泳遷移率實驗(EMSA)、原位雜交(ISH)、Northern Blot(不推薦用于低豐度RNA檢測)、小RNA Northern、Southern Blot(不推薦用于單拷貝基因檢測)、菌落雜交、斑點印跡雜交分析等。
試劑盒組成:
| 成分 | 規格 |
| TdT緩沖液,5× | 20μl |
| TdT(末端轉移酶,10U/μL) | 10μl |
| dATP,2mM | 5μl |
| 標記核苷酸 | (A、B、C不同,見注) |
| 超純水 | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
注:A型用于自選標記,用戶需自備標記核苷酸,本產品不提供標記核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量離心管中按下表設置一個20μl體系的標記反應(如果需要標記更多探針,請增加標記體積而不要增加探針DNA的濃度):
| 成份 | 用量 |
| 探針DNA | 100-200 pmol |
| TdT Buffer,5× | 4μl |
|
標記核苷酸,1mM (A型需自備標記核苷酸) | 1μl |
| dATP,2mM | (見下注) |
| TdT末端轉移酶(10U/μL) | 2μl |
| 超純水 | 補到20μl |
注:dATP可以不加,但這樣得到的加尾全部是標記核苷酸,由于空間阻礙,靈敏度不一定zuì佳。如果雜交效果不好,摻入一定比例的dATP到標記核苷酸中,以控制標記的密度,提高比活。具體比例如何可以自己優化。
2. 37℃反應15分鐘,延長到30分鐘也可以。如果沒有非標記核苷酸存在,一般可以加尾3-5個Biotin或DIG標記的核苷酸(標記物空間阻礙抑制延長);如果有在加尾反應中加入一定比例的非標記核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本試劑盒只提供dATP而已),每條探針上可加上約100個核苷酸,平均含5個標記核苷酸
3. 70℃ 10分鐘滅活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE電泳+銀染(相關試劑需要另購)檢測標記效率,帶標記的探針泳動速度將低于沒標記的探針。
5. 如果是非同位素標記,探針不需純化可以直接用于雜交。如果需要純化非同位素標記的探針,請不要酚/lǜ仿抽提,因為非同位素標記物一般會使探針DNA進入有機相而丟失。
6. 使用時需將探針以1-8 ng/μL的終濃度加入到雜交液中(如果探針是雙鏈DNA,加入前還需熱變性)。如果不立即使用,非同位素標記的探針DNA可-20℃長期放置一年,同位素標記的探針DNA不能放置。
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