ALH088 柱式質粒大量提取試劑盒
- 產品/服務：ALH088 柱式質粒大量提取試劑盒
- 型 號：ALH088
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價：面議
- 更新日期：2023-04-21
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數：964
產品簡介
北京百奧萊博供應的柱式質粒大量提取試劑盒用于科學研究，我公司的柱式質粒大量提取試劑盒品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...
產品詳細介紹
特別提示：包括柱式質粒大量提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱：柱式質粒大量提取試劑盒
英文名稱：A large number of Plasmid Extraction Kit (centrifugal column type)
產品貨號：ALH088
產品規格：10次
本試劑盒適用于大規模高純度質粒制備。采用改進SDS-堿裂解法裂解細胞，離心吸附柱內的硅基質膜在高鹽、低pH值狀態下選擇性地結合溶液中的質粒DNA，再通過漂洗液將雜質和其它細菌成分去除，zuì后低鹽、高pH值的洗脫緩沖液將純凈質粒DNA從硅基質膜上洗脫。
試劑盒組份(10次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
漂洗液WB————————————50ml
洗脫緩沖液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套
試劑盒特點：
1.離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異小，可重復性好?？朔藝a試劑盒膜質量不穩定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、氯fǎng等試劑，也不需要乙醇沉淀。快速、方便，從100-200ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養液中，可快速提取0.2-0.5mg純凈的高拷貝質粒DNA，提取率達80 %左右。
3.獲得的質粒產量高、超螺旋比例高、純度好，可以直接用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。
注意事項
1. 所有的離心步驟如未加另外說明均在室溫完成，使用轉速可以達12000g，帶50ml轉頭的臺式離心機。
2. 溶液P3中含有刺激性化合物，操作時要戴乳膠手套，避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
3. 提取質粒的量與細菌培養濃度、質粒拷貝數等因素有關。如果所提質粒為低拷貝質粒或大于10kb 的大質粒，應加大菌體使用量，同時按比例增加P1、P2、P3的用量，洗脫緩沖液應在70℃預熱。可以適當的延長吸附和洗脫的時間，提高提取效率。
4. 得到的質粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可能為2條或者多條DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構象質粒泳動位置不一造成，與提取物培養時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。本公司產品正常操作情況下基本超螺旋可以超過90%。
5. 質粒DNA確切分子大小，必須酶切線性化后，對比DNA分子量Marker才可以知道。處于環狀或者超螺旋狀態的質粒，泳動位置不確定，無法通過電泳知道其確切大小。
6. 洗脫液EB不含有螯合劑EDTA，不影響下游酶切、連接等反應。也可以使用水洗脫， 但應該確保pH大于7.5，pH過低影響洗脫效率。用水洗脫，質粒應該保存－20℃。質粒DNA如果需要長期保存，可以用TE緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影響下游酶切反應，使用時可以適當稀釋。
儲存條件：室溫，有效期12個月。
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1.操作簡單，只用一步(約5-10分鐘)即可以得到用于PCR擴增的DNA 模板，不需要任何離心、抽提等操作步驟，比常用的Chelex100提取方法和苯酚/氯fǎng方法快。
2.兼容性廣，可以用于幾乎所有的分子生物學樣品，包括細菌、昆蟲、真菌、各種植物、各種動物、法醫樣品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛發、組織樣品、口腔細胞和FTA卡)、石蠟組織切片等。
3.環保健康，不使用任何有毒有害的試劑。
4.尤其適用于大規模育種篩選和臨床篩選。
試劑盒組成：
| 成分 | 規格 |
| 一步式廣譜DNA提取試劑 | 10ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。
使用方法：
1. 將約2μl液體樣品(如全血、細胞培養液)或2mg的固體樣品(如動物組織，約半粒芝麻大小)加入到50μl 本產品中。
注意：樣品加入量可能需要根據其DNA的含量稍做調節，如果樣品DNA含量少，則用量要增加，但總液體樣品用量zuì好不要超過本產品用量的1/10；固體樣品用量zuì好不要超過1mg/10μl的比例。下面是部分常見生物樣品的DNA含量：
| 材料 | DNA含量 |
| 精液 | 150-300μg/mL |
| 血液 | 20-40μg/mL |
| 精斑 | 20-30μg/cm2 |
| 唾液 | 1-10μg/mL |
| 血斑 | 250-500 ng/cm2 |
| 口腔拭子 | 100-1500 ng/拭子 |
| 組織 | 50-500 ng/mg |
| 陰道拭子 | 10-3000 ng/拭子 |
| 骨頭 | 3-10 ng/mg |
| 拔出的帶發根頭發 | 1-750 ng/發根 |
| 尿液 | 1-20 ng/mL |
| 自然脫落的帶發根頭發 | 1-10 ng/發根 |
2. 80℃加熱5分鐘后。
注意：此步的條件可以根據樣品的質地稍做調節。如果是液體樣品，室溫處理1-3分鐘即可。如果是難以破裂的細胞和材料(如酵母、石蠟組織切片、血斑)，則保溫時間可以延長到10-30分鐘。
3. 簡短振蕩混勻后取裂解物直接進行PCR(裂解物體積zuì好不要超過PCR 體積的1/10)。
4.其余同常規操作。
疑難解答：
Q： 本產品與美國BioVenture的GeneReleaser 有何區別？
A： 本產品處理簡單，只需要80℃加熱5分鐘即可；而GeneReleaser 加熱處理復雜而繁瑣，共需要9 步處理，累計時間需要10 余分鐘量(具體是65℃ 30s，8℃ 30s，65℃ 90s，97℃ 180s，8℃ 60s，65℃ 180s，97℃ 60s，65℃ 60s，80℃放置)，手工操作時十分難以控制。
Q： 用本產品提取的DNA 能否用電泳方法檢測？
A： 由于DNA含量太少，不能用電泳方法檢測。
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